基于TLR4/MyD88/NF-κB通路研究愈疡胶囊抗中耳炎的作用

罗伦才，童 妍，张兴国，陈 礴，钟振东(.凉山彝族自治州第二人民医院，西昌 65000；.西南交通大学生命科学与工程学院药学系，成都 600；．四川省医学科学院,四川省人民医院实验动物研究所，成都 60000)

中耳炎(OM)是儿童常见的上呼吸道细菌感染疾病，也是导致传导性听力损失的主要原因[1-2]。OM是慢性炎症，表现为中耳裂处黏液性积液的积累。愈疡胶囊是凉山彝族自治州第二人民医院(以下简称我院)特色制剂，该制剂对OM、鼻窦炎、术后感染和窦道等外科感染性疾病均具有显著疗效。本研究拟使用愈疡胶囊对细菌感染性OM进行实验，探讨其体内外抗菌抗炎效果及相关机制，为寻找治疗OM的药物做基础研究。

1 仪器与材料

1.1仪器 DSX-30型手提式高压蒸汽灭菌器(上海申安医疗器械厂)；W-CJ-2F型净化工作台(苏州博莱尔净化设备有限公司)；BA400 Digital型数码三目摄像显微镜(麦克奥迪实业集团有限公司)；Image-Pro Plus 6.0型图像分析软件(美国Media Cybernetics公司)；Spectra MAX Plus384型酶标仪(美谷分子仪器有限公司)。

1.2试药 愈疡胶囊(批号190901，规格：0.45 g·粒-1，1 g药粉相当于原生药1.5 g)，我院自制；左氧氟沙星(批号DW15201，规格：0.5 g·片-1)，购自第一三共制药(北京)有限公司；MH培养基(批号028040)，购自广州环凯微生物科技有限公司；白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、免疫球蛋白A(IgA)和免疫球蛋白G(IgG)的Elisa试剂盒(批号：ZC-36391，ZC-36404，ZC-37624，ZC-37000，ZC-37002)，均购于上海茁彩生物科技有限公司。Toll-样受体4抗体(TLR4，批号A5258)和β-actin抗体(批号AC026)，购于武汉爱博泰克生物科技有限公司；髓样分化蛋白-88抗体(MyD88,批号ab2064)，p-NF-κB抗体(批号ab86299)和生物素化山羊抗兔IgG(批号ab6721)，均购于英国艾博抗(上海)贸易有限公司。……