TTC法测定金荞麦种子生活力条件的优化

檀龙颜 吴依琳 马洪娜

贵州中医药大学药学院，贵州 贵阳 550025

金荞麦(Fagopyrumdibotry)为蓼科荞麦属(Fagopyrum)多年生草本植物，以干燥根茎入药[1-2]。现代药理学[3]研究表明金荞麦根据具有抗炎镇痛、抗氧化、抗肿瘤、抗菌和增强免疫力的作用，在临床上能够治疗呼吸系统疾病、肠道系统疾病和肿瘤等。同时，金荞麦种子中富含蛋白质、脂类和维生素等，具有较高的营养价值和保健作用[4]。此外，金荞麦茎叶为牛羊等牲畜喜食，是一种优良牧草[5]。因此，金荞麦为一种具有较高经济价值的资源植物。种子是种子植物的繁殖体，也是植被恢复和重建的物质基础，而种子的生活力检测是预判种子是否具有繁殖价值的重要手段[6]。本研究采用正交试验、单因素试验和Central Composite Design 响应面试验对 TTC 法测定金荞麦种子生活力的条件进行筛选和优化，以期种子为生物学研究和规模化生产提供参考资料。

1 材料与方法

1.1 材料 金荞麦种子采自贵州中医药大学药学院种植资源圃，经贵州中医药大学药学院檀龙颜副教授鉴定为金荞麦(Fagopyrumdibotrys)种子，采种后阴干，于4 ℃保存备用。测定试剂为氯化三苯基四氮唑(TTC) 。

1.2 方法

1.2.1 种子处理 种子浸泡：将去除杂质，种皮无破损的金荞麦种子置于烧杯中浸泡24 h后，从种子中间切断，将胚切面较完整的每50个半粒种子置于直径9 cm的培养皿中进行后续实验。种子染色：方法同马洪娜等[6]。

1.2.2 正交试验 选取TTC浓度(A) (0.3%、0.5%、0.7%)、染色温度(B)(35 ℃、40 ℃、45 ℃)、染色时间(C)(2 h、3 h、4 h)3个因素的不同水平，每组50个半粒种子，通过正交表设计正交试验。……