蚕蛾公补酒矫味工艺研究

王雪莹，王永红，蒋燕霞，原欢欢，李红亮，彭世陆，禹奇男

（太极集团重庆涪陵制药厂有限公司，重庆 408000）

蚕蛾公补酒具有补肾壮阳、养血、填精功效，临床多用于肾阳虚损、阳痿早泄、宫冷不孕、性功能衰退等症的治疗，虽疗效确切，但口感差，有明显麻舌感，严重影响患者服药依从性。为改善口感，本研究中通过查阅文献和麻味溯源，确定蚕蛾公补酒处方中蛇床子药材为麻味的来源；以炮制后蛇床子素的量和麻舌感评分值为指标，采用正交试验设计优选最佳炮制工艺，加入不同矫味剂，以达到改善口感、矫味的目的。现报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器

粉碎机、1260-DAD 型高效液相色谱仪（美国Agilent 公司）；AE240 型电子分析天平（梅特勒-托利多仪器＜上海＞有限公司）；KQ-500DE 型数控超声波清洗仪（昆山市超声仪器有限公司）；DFY-200C 型高速万能粉碎机（上海皓庄仪器有限公司）。

1.2 试药

蛇床子素对照品（中国食品药品检定研究院，批号为110822-201710，纯度为99.5%）；白酒（江津白酒厂）；乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为纯化水。雄蚕蛾（制）、人参、熟地黄、麸炒白术、当归、枸杞子、淫羊藿、盐补骨脂、仙茅、蛇床子、肉苁蓉、菟丝子等药材均购于桐君阁大药房，经太极集团重庆涪陵制药厂杨修齐主任中药师鉴定为正品。

2 方法与结果

2.1 麻味溯源

为确定麻味来源，将处方中可能产生麻味的5 味药材（补骨脂、仙茅、蛇床子、肉苁蓉、菟丝子）按蚕蛾公补酒工艺要求单独渗漉，根据麻味感受情况制订评分依据（见表1）。选取50 名志愿者对编号为1 ～5 的渗漉液进行感官评分，取平均值，蛇床子渗漉液麻味程度为重度，确定蛇床子药材是蚕蛾公补酒中麻味的主要来源，详见表2。

2.2 蛇床子素含量测定

2.2.1 色谱条件

色谱柱：Spursil C18柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：乙腈-水（65 ∶35，V/ V）；流速：1.0 mL/min；检测波长：322 nm；柱温：25 ℃[1]。

表2 药材麻味评定结果Tab.2 Evaluation results of tingly sensation of medicinal materials

2.2.2 溶液制备

对照品溶液：取蛇床子素对照品适量，精密称定，加乙醇制成质量浓度为45 μg/mL 的对照品溶液。

供试品溶液：取蛇床子药材粉末（过3 号筛）约0.1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入无水乙醇25 mL，密塞，称定质量，放置2 h，超声（功率300 W，频率50 kHz）处理30 min，放冷，再称定质量，用无水乙醇补足减失的质量，摇匀；精密量取上清液5 mL，置10 mL 容量瓶中，加无水乙醇定容，摇匀，即得。

2.2.3 方法学考察

适用性试验：取上述对照品溶液、供试品溶液各适量，按选定色谱条件进样测定，色谱图见图1。结果理论板数按蛇床子素峰计应不低于3000，分离度均大于1.5，基线分离良好。

图1 高效液相色谱图1.osthole A.Reference solution B.Test solutionFig.1 HPLC chromatograms

线性关系考察：分别精密量取2.2.2 项下对照品溶液0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 mL，置5 mL 容量瓶中，加流动相定容，摇匀，制成系列对照品溶液。精密量取10 μL，按选定色谱条件进样测定，记录峰面积。以蛇床子素质量浓度（X，μg/mL）为横坐标、峰面积（Y）为纵坐标进行线性回归，得回归方程Y= 4104.2X+274.2（r=0.9996）。结果表明，蛇床子素质量浓度在12.663 ～126.63 μg/mL 范围内与峰面积线性关系良好。

精密度、稳定性、重复性、加样回收试验：按标准进行方法学考察，结果精密度、稳定性、重复性、加样回收试验的RSD均小于2.0%，表明仪器精密度良好，供试品溶液在室温放置12 h 内基本稳定，本方法重复性良好。

2.3 工艺优选

2.3.1 正交试验

以润制时间（A，min）、炒制时间（B，min）、炒制温度（C，℃）为考察因素，以麻舌感评分、蛇床子素含量为考察指标，采用L9（34）正交试验设计优选蛇床子药材的制备工艺[2-4]。因素水平见表3，L9（34）正交试验设计与结果见表4，方差分析结果见表5。

由表4、表5 可知，对麻舌感影响顺序由强到弱为C ＞B ＞A，3 个因素对蛇床子素含量均无显著影响。最终确定最佳组合为A2B3C3。即蛇床子药材去麻味炮制工艺为加石灰水润制30 min，炒制45 min，炒制温度100 ℃。

表3 因素与水平Tab.3 Factors and their levels

表4 L9（34）正交试验设计与结果Tab.4 Design and results of L9（34）orthogonal test

表5 方差分析结果Tab.5 Analysis of variance results

2.3.2 验证试验

精密称取炮制后蛇床子药材样品粉末5.0 g，按2.1.2 项下方法制备供试品溶液，取适量，按选定色谱条件测定蛇床子素，并计算含量。结果样品中蛇床子素的平均含量为1.43%，1.56%，1.47%，炮制后药材的渗滤液麻舌感均减弱，说明该炮制工艺合理。

2.4 矫味工艺考察

2.4.1 甜度剂量

分别取样品各1 L，分别加入1，4，7，10，13，16，20 g蔗糖，考察口感。结果每1 L 样品中加入10 g 蔗糖时甜度适宜，口感最佳。

2.4.2 甜味剂

分别取样品1 L，根据不同甜味剂的甜度倍数[15]（见表6），加入甜度相当于10 g 蔗糖的不同甜味剂。对比不同甜味剂对蚕蛾公补酒口感的改善情况，进行人工感官评价。结果，添加50 mg/L 甜菊素时蚕蛾公补酒甜度适宜，可有效遮蔽剂型中的微麻味，降低由酒精度引起的辛辣、刺激感。

表6 不同甜味剂的甜度倍数Tab.6 Sweetness times of different taste-modifyimg prescriptions

2.4.3 验证试验

分别取样品各1 L，共3 批，分别加入50 mg 甜菊素，制得的蚕蛾公补酒麻味评分为2 ～4 分，轻度麻味，不影响服用，可接受。较原工艺制得的样品麻味减轻，甜度适宜。

3 讨论

蛇床子药材的炮制始见于《雷公炮炙论》，唐代后炒制成了蛇床子药材的主要炮制方法。《本草纲目》记载：“凡服食，即去皮壳，取仁微炒杀毒，即不辣也。”有文献报道，蛇床子药材的麻味主要为香豆素类成分[5-9]，比较蛇床子生品、炮制品理化性质和蛇床子素含量，发现炒、炙的炮制方法可降低蛇床子素含量[10-12]，就是传统炮制描述的“改变其燥性”，这也是炮制后降低蛇床子药材毒性的一个方法。

药典收载的中药材大多具有不良口感，矫味研究将是解决口服制剂中药“粗、大、黑、苦”的重要思路之一。在研究过程中，需综合考虑多方面因素，本研究中通过药材炮制及添加矫味剂工艺改善蚕蛾公补酒的口感，以蛇床子素含量和麻舌感评分为指标，优化蛇床子药材炮制工艺，从源头去除麻味；适宜的甜度可以遮蔽蚕蛾公补酒中的麻味、苦味或不良气味，蚕蛾公补酒处方中原使用单糖浆、炼蜜矫味，但剂量不够、调节作用有限，补加甜味剂可以有效地改善口感，降低由酒精度引起的辛辣、刺激感[13-15]。最终确定蛇床子药材去麻味炮制工艺为：加石灰水润制30 min，炒制45 min，炒制温度100 ℃，每1 L 蚕蛾公补酒中加入甜菊素50 mg。该工艺操作简便，精密度、稳定性、重复性、耐用性好，可用于蚕蛾公补酒的矫味。