苏中地区猪圆环病毒2 型感染情况及免疫效果调查

颜友荣，方向红，魏 宁，肖 宁

（江苏农牧科技职业学院，江苏 泰州 225300）

猪圆环病毒（PCV）自20 世纪70 年代被发现以来，已在全世界广泛传播，对养猪事业造成巨大影响[1]。PCV-2有较强的致病性[2-3]，在我国断奶仔猪多系统衰竭综合征对猪致病性较明显且影响较大[4]。随着国产PCV-2 灭活苗的推广应用，该病发病率呈明显下降趋势，但仍有部分地区有PCV-2感染的报道[5-6]。为了解苏中地区PCV-2感染情况及疫苗免疫效果，本研究对2020 年9～12 月期间收集到的苏中地区15家猪场的363样本进行检测，以期为苏中地区不同规模猪场防控PCV-2提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 样本采集（见表1）

2020 年9～12 月期间，根据养殖规模在苏中地区选择15 个均免疫接种过PCV-2 灭活苗的猪场，其中大型猪场4个（存栏量≥5 000头）、中型猪场5个（存栏量1 000～5 000头）、小型猪场6 个（存栏量≤1 000 头）。根据猪场实际情况，共采集363份血清样本与363份疑似PCV2病料组织样本，-20 ℃保存。样本具体数量见表1。

表1 苏中地区不同规模猪场样本采集数量Tab.1 Number of samples collected from different pig farm in Central Jiangsu

1.1.2 试剂与耗材

基因组DNA 提取试剂盒、DNA 胶回收试剂盒、Taq DNA 聚 合 酶、6×DNA Loading Dye、10×PCR Buffer、dNTPMix、25 mmol/L MgCl2等，均购自生工生物工程（上海）股份有限公司；pMD18-T 载体，购自上海宝生物工程有限公司；ELISA试剂盒，购自瑞普生物药业有限公司。

1.1.3 试验仪器

普通PCR 仪（Thermo 公司，TCA5020）、荧光定量PCR循环仪（ABI 公司，7500）、分析天平（Sartorius 公司）、全自动样本快速研磨仪（上海净信实业发展有限公司）、台式冷冻微量高速离心机（Thermo 公司，Micro7R）、移液器（Thermo 公司，Finnpipette F）、多功能酶标仪（Molecular Devices公司）等。

1.2 试验方法

1.2.1 荧光定量PCR抗原检测方法

猪病料样本检测采用荧光定量PCR 法，按照病毒DNA 提取试剂盒说明书操作，进行PCR 扩增。……