川芎嗪通过抑制内质网应激减轻小肠缺血再灌注损伤的研究

孔维，尹清臣

小肠缺血再灌注损伤是肠道手术、创伤、休克、心功能不全等常见并发症，导致肠黏膜屏障受损使肠道内细菌、毒素进入血液循环，引发系统性炎症反应并诱发细胞凋亡，是导致患者死亡的重要因素[1-4]。近年来研究发现，内质网应激是诱导炎症反应和细胞凋亡的重要信号通路[5-6]。因此，以抑制内质网应激为切入点，研究能够防治小肠缺血再灌注损伤的新型药物具有重要的临床意义。川芎嗪(Tetramethylpyrazine，TMP)是从我国传统中药川芎中提取的一种活性生物碱，化学名 2,3,5,6-四甲基吡嗪，具有良好的抗炎、抗凋亡活性[7-8]。本研究在小肠缺血再灌注损伤大鼠模型造模前给予TMP预处理，研究TMP对小肠缺血再灌注损伤及内质网应激通路的影响。

1 材料与方法

1.1 实验动物与分组

无病原微生物级雄性Wistar大鼠120只，体质量(220～240)g，由河北医科大学实验动物中心提供，动物许可证号：SYXK(冀)2018-004，实验前适应性饲养7 d，实验前12 h禁食禁水。将120只大鼠数字编码后，按照随机数字表法分为假手术组、模型组和TMP低、中、高(15、30、60 mg/kg)剂量组[8]，每组24只。

1.2 药物与试剂

磷酸川芎嗪注射液(TMP，规格2 mL∶50 mg)购自扬子江药业集团有限公司(批号20191219)；CRP(货号：H126，批号：191228)、TNF-α(货号：H052，批号：191017)、IL-1β(货号：H002，批号：200114)；酶联免疫(ELISA)检测试剂盒和TUNEL试剂盒(货号：G001-2-2，批号：191125)购自南京建成生物工程研究所；糖调节蛋白78(GRP78)抗体(货号：bs-1219R，批号：20191208)、增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)抗体(货号：bs-1630R，批号：20200107)、激活型半胱氨酸蛋白酶-12(Cleved Caspase-12)抗体(货号：bs-1105R，批号：20200311)、Cleved Caspase-3抗体(货号：bs-0081R，批号：20191108)、核因子-κB(NF-κB)抗体(货号：bs-0465R，批号：20191216)和山羊抗兔IgG二抗(货号：bs-0294P，批号：20191125)购自北京博奥森生物科技有限公司；……