ω-3多不饱和脂肪酸对小鼠急性胰腺炎自噬功能及PI3K/Akt通路的影响

孔祝容，唐立，蒋文俊

重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis，SAP)是指因胰酶异常激活、胰腺局部炎症反应，引起的以全身炎症综合征及多器官功能衰竭、死亡为主要特征的急腹症[1-2]。SAP发病急、并发症多、死亡率高，且无特殊的药物及治疗方法[3]。SAP发病机制复杂，目前研究发现，胰腺腺泡细胞坏死凋亡、炎症反应、氧化应激、自噬等与SAP发生发展关系密切[4]。磷酸肌醇-3激酶(phosphoinositide-3 kinase，PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B，Akt)通路可调控细胞凋亡、自噬、炎症反应等多种生理过程[5]，且PI3K/Akt通路在SAP发生发展中扮演重要角色，并可能为SAP的治疗提供新的靶点[6]。寻找SAP特殊的药物及治疗策略，一直是临床研究的热点。ω-3多不饱和脂肪酸(omega-3 polyunsaturated fatty acids，ω-3PUFA)为人类必须的脂肪酸，是一种具有抗炎、抗氧化作用的免疫营养物质[7]，近来临床报道发现，ω-3PUFA干预治疗可有效降低SAP及脓毒症患者的炎症反应进程[8]，降低SAP患者发生器官衰竭的风险[9]，预示ω-3PUFA可能为治疗SAP的潜在有效药物。但ω-3PUFA缓解SAP炎性反应及死亡症状的具体机制还不甚明确。本研究建立SAP小鼠模型，从PI3K/Akt通路介导的炎症、自噬、凋亡等方面，探究其ω-3PUFA缓解SAP病理进程的可能机制，以期为SAP的临床治疗及ω-3PUFA的开发应用，提供一定的实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 动物 健康雄性BALB/C小鼠，体质量20～22 g，6～7周育龄，购自于首都医科大学实验动物科学部[SCXK(京) 2015-0006]，所有小鼠于本院动物房中饲养。本实验经本院伦理委员会批准，试验动物符合3R原则。

1.1.2 主要试剂及仪器 ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3PUFA)(货号：ST1267，上海碧云天生物技术有限公司)；自噬抑制剂(3-甲基腺嘌呤，3MA)(货号：CD-07263，武汉纯度生物科技有限公司)；……