LC-MS/MS 法测定口含烟中的4 种亚硝基氨基酸

王冰，余晶晶，蔡君兰，王昇，刘克建，赵晓东，刘绍锋，秦亚琼，谢复炜，王晓瑜

中国烟草总公司郑州烟草研究院，郑州高新技术产业开封区枫杨街2号 450001

口含烟是一种重要的新型烟草制品，不产生烟气，又能满足尼古丁摄入的需求。随着全球控烟形势的日趋严峻，口含烟因其独特的使用方式逐渐成为烟草消费的重要补充形式以及国际烟草领域的重要发展趋势[1-4]。目前市场上的口含烟主要有3 类产品形式，分别为湿含烟（美式湿含烟Moist snuff /瑞典含烟Snus）、含化型制品、胶基型制品；其核心成分仍然是烟草（包括烟丝、烟草碎片、烟草颗粒及烟末等）或烟草关键成分（如烟碱、烟草香味物质等）提取物[5-6]。

在烟草加工过程和卷烟燃烧过程中共有4 种类型的亚硝胺生成，它们包括：挥发性亚硝胺（VANs）、烟草特有亚硝胺（TSNAs）、非挥发性亚硝胺和N-亚硝基氨基酸[7]。目前国内外展开了大量关于TSNAs测定及形成机理的研究[8-9]，挥发性亚硝胺方面也有文献报道[10-11]，但在国内尚未有烟草中亚硝基氨基酸方面的研究。

亚硝基氨基酸是由烟草中的氨基酸以及带有仲氨基的蛋白质发生亚硝化反应生成的。截止目前，口含烟中共有11 种N-亚硝基氨基酸被测定出来，而其中4 种N-亚硝基肌氨酸（N-Nitrososarcosine，NSAR）、3-（N- 甲基亚硝基氨基） 丙酸（3-(N-methylnitrosamino) propionic acid ，MNPA）、4-（N-甲基亚硝基氨基）丁酸（4-(N-methylnitrosamino) butyric acid，MNBA）、亚硝基氮杂环丁烷-2-羧酸（Nitrosoazetidine-4-carboxylic acid ，NAzCA）在动物实验中被确认为致癌物，可诱发小鼠肝癌、肺癌、膀胱癌、食道癌，被IARC 列入无烟气烟草制品28 种有害物质名单之中[12-13]。国外对口含烟中N-亚硝基氨基酸的文献报道主要集中在1985 年到1999 年[14-21]，主要采用重氮甲烷衍生-气相色谱-TEA 方法对口含烟中N-亚硝基氨基酸含量及随存贮条件的变化进行了研究；……