汉坦病毒核酸和IgM抗体检测方法在肾综合征出血热早期实验室诊断中的运用

邓志士，刘佩佩，雷锦辉，刘师文，龚甜，熊英

（1.江西省高安市人民医院，江西 高安 330800；2.江西省疾病预防控制中心，江西 南昌 330029）

肾综合征出血热（HFRS）是由汉坦病毒引起的一种在东亚特别是中国流行的鼠传疾病[1]，全球病死率为1%～5%[2]。其发病机制可能是一个复杂的多因素过程，包括免疫反应、血小板功能障碍和内皮细胞屏障功能失调[3]。发病早期采用有效的实验室诊断方法提高诊断率对提高HFRS患者治愈率，降低病死率，减轻疾病负担非常重要[4]。

HFRS早期实验室诊断传统方法为血清特异性IgM抗体检测[5]，主要方法包括是酶联免疫吸附测定（ELISA）和胶体金法。然而IgM抗体检测在早期临床标本应用中显示出较高的假阴性率，易漏诊[6-7]。用随着病毒核酸检测技术的进步，不同类型的实时荧光PCR法在汉坦病毒检测方面应用也有报道[8-10]，但是目前尚未见关于核酸检测和IgM抗体检测在HFRS早期病例诊断中的价值比较研究。

本研究对93例HFRS疑似病例急性期血清标本进行回顾性检测分析，采用实时荧光RT-PCR法检测汉坦病毒核酸，采用ELISA和胶体法检测汉坦病毒IgM抗体，比较核酸检测和血清学IgM检测在HFRS早期病例诊断中的价值，为HFRS早期诊断提供更多依据。

1 材料与方法

1.1 样本来源 收集高安市人民医院2020年5月至2021年5月HFRS疑似病例急性期血清标本（发病至采样≤7 d）93例，冻存于-70℃以下冰箱。疑似病例符合流行性出血热诊断标准定义（WS278-2008）。

1.2 试剂和仪器 汉坦病毒IgM抗体检测试剂盒（北京万泰）、核酸提取试剂（Qiagen）、核酸扩增试剂（Thermo fisher Scientific）、核酸提取仪(Qiagen，96)、荧光定量PCR仪（ABI，7500型）、酶标仪（安图斯，anthous 2010）。……