血清COMP、血浆ADAMTS13与维持性血液透析患者血管钙化的相关性分析

杨静，张悦，刘秋艳

（河南省直第三人民医院肾内科，河南 郑州 450007）

维持性血液透析（MHD）是目前临床治疗终末期肾脏病的常用手段，虽能有效控制疾病进展，但同时可导致患者出现各种并发症，其中血管钙化是MHD治疗过程中的严重并发症之一，也是导致患者心血管死亡的重要因素[1-2]。因此，如何诊断以及预防MHD发生血管钙化对于改善患者预后十分重要。软骨寡聚基质蛋白（COMP）已被应用于骨关节炎（OA）的疗效判断及预后等研究中[3-4]，但最新研究发现，COMP在心血管疾病的发生、发展中具有重要作用[5]。血管性血友病因子裂解酶（ADA MTS13）一种调控vWF结构与功能的的金属蛋白酶，具有抑制血小板黏附、聚集及微血管性血栓形成等作用[6]。目前国内关于血清COMP、ADAMTS13与血管钙化的相关性的研究较少。本研究拟分析血清COMP、血浆ADAMTS13与MHD患者血管钙化的相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料 将2017年12月至2020年12月在我院进行维持性血液透析的120例患者作为研究对象。男性65例，女性55例；年龄25～80岁，平均（55.36±3.65）岁；原发疾病：慢性肾小球肾炎39例，高血压肾小动脉硬化28例，糖尿病肾病25例，系统性血管炎12例，紫癜性肾炎6例，其他10例。纳入标准：⑴血液性透析治疗且规律透析≥3个月；⑵患者/家属签署知情同意书。排除标准：⑴透析时间＜3个月；⑵合并原发性甲状旁腺或恶性肿瘤者；⑶3个月内进行较大手术者；⑷近期使用激素或免疫抑制剂药物者；⑸伴有癫痫发作者；⑹中途退出者。本次研究已获得我医学伦理委员会的批准。

1.2 方法 ⑴收集临床资料：包括年龄、性别、透析时间、体质指数（BMI）、吸烟史、高血压、糖尿病、白蛋白（ALB）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、碱性磷酸酶、血钙、血磷、钙磷乘积、全段甲状旁腺素（iPTH）等。⑵血管钙化评估：采用胸部和腹部计算机断层扫描检测MHD患者血管钙化（包括胸主动脉、腹主动脉和冠状动脉钙化）情况，随后由经验丰富的、固定的影像科医生和肾内科医生根据动脉存在的钙化或斑块共同判定患者是否存在血管钙化,并将本研究患者分为血管钙化组68例、无血管钙化组52例。⑶COMP、ADAMTS13与生化指标检测：所有患者入院后抽取两份清晨空腹外周静脉血，一份5 ml不抗凝，室温3000 r/min离心10 min，取上清液存放至-80℃冰箱内保存。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清COMP水平；采用日本日立公司生产的全自动生化分析仪（HITACHI 7600-110）检测患者TG、TC、HDL-C、LDL-C、ALB、碱性磷酸酶、血钙、血磷、钙磷乘积水平，iPTH采用全自动电化学发光免疫分析仪测定（E601，Roche公司，瑞士）。另一份3 ml至枸橼酸钠抗凝离心管，充分颠倒混匀后1 h内以3000 r/min离心10 min，取上层血浆置于-80℃低温冰箱保存。采用ELISA检测血浆ADAMTS13水平，试剂盒均由武汉华美生物有限公司公司提供，具体步骤严格按说明书进行操作。

1.3 统计学方法 采用SPSS 23.0软件进行数据分析。正态分布计量资料以（±s）表示，两组比较采用t检验；计数资料以率（%）表示，采用χ2检验；相关性分析采用Pearson相关分析；采用受试者工作特性曲线（ROC）分析血清COMP、血浆ADAMTS13对MHD发生血管钙化的诊断价值，多因素Logistic回归分析MHD患者发生血管钙化相关因素；P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组一般资料与生化指标比较 血管钙化组年龄、透析时间、糖尿病、高血压及钙磷乘积、iPTH、COMP水平均明显高于无血管钙化组，血钙、ADAMTS13水平低于无血管钙化组（P<0.05），见表1。

表1 两组一般资料与生化指标比较

2.2 MHD患者血清COMP、血浆ADAMTS13水平与各指标相关性分析COMP水平与透析时间、年龄、iPTH、钙磷乘积均呈正相关，与血钙呈负相关（P<0.05）；ADAMTS13水平与透析时间、年龄、iPTH、钙磷乘积均呈负相关，与血钙呈正相关（P<0.05），见表2。

表2 MHD患者血清COMP、血浆ADAMTS13水平与各指标相关性

2.3 COMP、ADAMTS13对MHD发生血管钙化的预测 经ROC曲线结果显示：COMP曲线下面积、敏感度、特异度分别为0.792、85.3%、80.6%；ADAMTS13曲线下面积、敏感度、特异度分别为0.810、82.4%、79.2%。且COMP、ADAMTS13曲线下面积、敏感度、特异度均高于iPTH、钙磷乘积指标，见表3。

表3 COMP、ADAMTS13对MHD发生血管钙化的预测

2.4 MHD发生血管钙化影响因素多因素Logistic回归分析 本研究以COMP、ADAMTS13、iPTH、钙磷乘积为自变量，以有无血管钙化为因变量（无=0、有=1），经Logistic回归分析得出，COMP、ADAMTS13、iPTH、钙磷乘积均为影响MHD发生血管钙化的相关因素，见表4。

表4 MHD发生血管钙化影响因素多因素Logistic回归分析

3 讨论

维持性血液透析（MHD）是治疗终末期肾脏病的常用方式，但治疗过程中由于容易出现血管钙化，而血管钙化能够引起患者出现心血管事件（心肌缺血、心力衰竭等），严重时导致患者死亡[7-8]。因此，早期诊断并预防MHD发生血管钙化至关重要[9]。

本研究结果显示，血管钙化组COMP水平高于无血管钙化组，ADAMTS13水平低于无血管钙化组（P<0.05），表明COMP、ADAMTS13与血管钙化的发生发展存在密切关系。相关性分析显示：COMP与iPTH、钙磷乘积均呈正相关，与血钙呈负相关；ADAMTS13与iPTH、钙磷乘积均呈负相关，与血钙呈正相关（P<0.05）,提示COMP、ADAMTS13可能是影响MHD患者血钙、iPTH和钙磷乘积的重要因素。ROC曲线结果显示：COMP、ADAMTS13曲线下面积、敏感度、特异度均高于iPTH、钙磷乘积指标，由此可见COMP、ADAMTS13对预测MHD发生血管钙化具有更高的价值。Logistic回归分析得出，COMP、ADAMTS13均是影响MHD发生血管钙化的相关因素。上述结果综合表明，血清COMP、血浆ADAMTS13二者有望作为临床预测、诊断维持性血液透析患者血管钙化的有效生物标志物。

COMP是一种由血小板反应家族的软骨细胞合成分泌的组织特异性基质蛋白，能够被血管平滑肌细胞合成，并且在血管钙化及脂质沉积为斑块的过程发挥重要作用[10]。而血管钙化是由于血管内皮细胞、平滑肌细胞转化为类成骨/软骨细胞，进而分泌有机质并伴随钙磷沉积等因素导致。COMP水平升高时，伴随平滑肌细胞迁移转化，血管内膜发生增生及中膜钙化[11]。ADAMTS13是一种含I型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶家族第13位成员，主要是由肝星状细胞和血管内皮细胞分泌与合成，不仅能够抑制炎症反应，还能通过上调血管内皮细胞表达而诱导血管生成[12-13]。ADAMTS13上调能够参与细胞外基质蛋白的清除，限制其过渡沉积，防止内膜纤维化[14]。ADAMTS13下调时，能够促进慢性肾脏病炎症反应与血管内皮细胞损伤，抑制细胞外基质蛋白清除，促进血管纤维化，导致患者发生血管钙化。当然，本研究也存在一定局限性，⑴由于条件限制，本研究只有一次“入院后”采集血样检测，并没有做治疗前和治疗后的比较；⑵不同患者透析时间（年）有长有短，患者相关指标数据在不同时间段有可能不一样，本研究并未观察相关指标的变化；上述问题有待下一步细化分析。

综上所述，MHD血管钙化患者血清COMP水平升高，血浆ADAMTS13水平降低，二者均是MHD患者发生血管钙化的相关因素，有望用作MHD患者发生血管钙化的预测生物标志物。