亚抑菌浓度抗生素对高毒力肺炎克雷伯菌毒力基因表达的影响

宋国滨，王 刚，黄 颖，吴文娟，徐元宏

高毒力肺炎克雷伯菌(

hypervirulent

Klebsiella

pneumoniae

,

hvKP

)及其相关的研究受到国内外广泛关注。但是目前，临床医生在治疗该菌引起的感染时，由于不合理应用抗生素，进入患者体内的抗生素浓度受到许多因素影响，比如指征使用是否合理、品种选择是否合理、时机使用是否合理，另外还与用药剂量、用药部位、用药方式以及患者自身消化吸收能力密切相关。因此，在这些因素的影响下导致进入患者体内的浓度不足以杀灭病原菌，而且亚抑菌浓度抗生素会显著影响菌株的病原学行为，这种影响也会随着抗生素的不同而有所变化。有研究表明，氧氟沙星、红霉素在亚抑菌浓度对空肠弯曲菌的作用下，不仅不能抑制病原菌繁殖，反而可以使繁殖更加活跃，合成释放毒素更加明显。该研究对

hvKP

在亚抑菌浓度抗生素作用下，研究2种毒力基因——

rmpA

、

aerobactin

的表达水平，为临床合理应用抗生素、更好地治疗患者提供相关依据。

1 材料与方法

1.1 菌株来源

收集2018年1月—12月的

hvKP

共57株。剔除同一患者相同部分的重复菌株。大肠埃希菌ATCC8739为质谱鉴定实验质控菌株，肺炎克雷伯菌(

Klebsiella

pneumoniae

,

KP

)质控细菌为ATCC700603,为本实验室保存。

1.2 实验仪器及试剂

高速冷冻离心机(上海力新仪器有限公司)；GeneAmp970基因扩增仪(美国PE公司)；C-880V CO孵箱、紫外线凝胶成像仪(美国Bio-Rad公司)；VITEK MS质谱仪(法国梅里埃公司)；抗菌药物(英国OXOID公司)；琼脂糖、引物(上海生工生物股份有限公司)；标志物DNA Marker、Premix TaqTM(日本TaKaRa公司)；VITEK MS CHCA基质液(法国梅里埃公司)；哥伦比亚血平板(合肥天达诊断试剂有限公司)；……