莫诺苷介导Nrf2通路对HIBI模型大鼠的抗氧化和神经保护作用

李江涛，尹永锋，王润青，张 平，赵 杰，刘荣丽，陈园园

低氧缺血性脑病是由于脑缺氧或缺血引起脑损伤，从而导致意识改变、肌张力变化，常引起诸如脑瘫、癫痫等后遗症。其中血管性痴呆(vascular dementia,VD)是一种由大脑低氧缺血引发的脑血管疾病，会损伤患者的学习和记忆，常伴随着运动失调、语言能力受损及人格障碍。阿尔茨海默病(alzheimer disease,AD)有约15%的患者会发生VD。山茱萸，中医称为“山珠玉”，莫诺苷是其主要活性成分，长期以来一直被用于治疗脑血管疾病和糖尿病。莫诺苷具有抗氧化应激、改善微血管循环、抗细胞凋亡和神经修复功能等多种生物活性。然而，莫诺苷对低氧缺血性脑损伤(hypoxic ischemic brain injury, HIBI)与转录因子NF-E2相关因子(Nrf)通路的相关性研究尚无报道。该文采用Rice法建立HIBI大鼠模型，探讨莫诺苷是否能够通过介导Nrf通路对HIBI模型产生正面影响。

1 材料与方法

1.1 实验动物及主要试剂

60只SPF级雄性SD大鼠，体质量240～280 g，中国科学院实验动物中心提供。莫诺苷(纯度≥98.0%，美国SIGMA公司)，水合氯醛(天津市大茂化学试剂厂公司)，苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色试剂盒(南京凯基生物有限公司)，化学发光液(密理博中国有限公司)，蛋白抽提试剂盒、二喹啉甲酸(bicinchoninic acid, BCA)蛋白测定试剂盒(北京索莱宝生物有限公司)，B细胞淋巴瘤2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X(Bcl2-associated X,Bax)、半胱天冬酶3(Caspase-3)、Caspase-9、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)、突触后致密蛋白95(postsynaptic density-95,PSD95)、海马突触素(synaptophysin,SYP)、转录因子NF-E2相关因子2[transcription factor nuclear factor erythroid 2(NF-E2)-related factor 2,Nrf2]和血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HO-1)一抗、二抗(英国Abcam公司)，超氧化物歧化酶(reactive oxygen species,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)检测试剂盒(上海信帆生物科技有限公司)。……