烟酰胺对鼻咽癌CNE-1细胞增殖、凋亡与迁移作用机制研究

杨亚利，张声源，潘增烽，陈欢珠，姚前尹

鼻咽癌是一种常见的头颈部恶性肿瘤，具有高复发和高转移性，主要分布在中国华南地区、东南亚和北非等区域。由于早期鼻咽癌患者症状的非特异性，临床上预测鼻咽癌发展的准确性不高。故研究鼻咽癌发生发展的分子机制，寻找用于鼻咽癌早期诊断及预后评估的分子标志物和安全有效的治疗药物有重要的临床意义。烟酰胺，又称维生素PP，具有加强DNA修复并参与能量代谢及肿瘤预防与治疗的作用。口服大剂量烟酰胺可增强鼻咽癌的放疗疗效，但其是否通过影响鼻咽癌细胞生长来增强疗效的分子机制需进一步确认。该研究以人鼻咽癌细胞CNE-1为研究对象，探讨烟酰胺对人鼻咽癌CNE-1细胞增殖、凋亡、周期和迁移能力的影响及其相关作用机制，旨在为其临床应用提供更多理论和实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料与主要试剂

人鼻咽癌CNE-1细胞购于中国科学院典型培养物保藏委员会上海细胞库。烟酰胺，纯度>99%，货号：YZ-1001 15-100 mg，品牌：中检所。RPMI-1640培养基和胎牛血清(美国Gibco公司)；青-链霉素(北京索莱宝公司)；CCK-8试剂盒(日本同仁公司)；Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒(北京全式金生物公司)；细胞周期检测试剂盒(南京凯基生物公司)；Transwell细胞培养板(货号：353097)和matrigel胶(货号：356234)(美国Becton,Dickinson and Company公司)；p53和MMP-9单克隆抗体(美国Cell Signaling Technology公司)。

1.2 主要仪器

IX70倒置显微镜(日本Olympus公司)；Tecan Infinite 200全自动酶标仪(瑞士TECAN公司)；流式细胞仪(美国Becton,Dickinson and Company公司)；电泳仪、转膜电泳槽( 美国BIO-RAD公司)。

1.3 人鼻咽癌细胞CNE-1细胞培养

人鼻咽癌细胞CNE-1用含10%胎牛血清、100 U/ml青霉素和100 mg/L链霉素的RPMI-1640培养基置于37 ℃、5% CO的细胞培养箱中培养，隔天换培养液。待……