miR-21调控STAT3信号通路对肾母细胞瘤细胞增殖及迁移的影响

符策君，吴丽珍，陈泽婷，林 海，孙为增

肾母细胞瘤是一种临床上常见的小儿恶性肿瘤，一般在1～3岁时期发病，几率约为8%，首发症状主要为腹部出现肿块，其发生对于病患的致残率、病死率以及家庭的生活状态均有一定的影响。肾母细胞瘤的治疗主要以手术及放化疗为主，对患儿的生存率有一定的积极影响，但仍有部分患儿疗效、预后不佳，因此对其发生进展的相关机制进行研究至关重要。微小RNA(microRNA，miR)是一种具有高度保守性质的非编码小RNA，对机体的生理病理等方面具有不可或缺的参与调控作用，在癌细胞的增殖、迁移、凋亡等过程中都有着举足轻重的调控作用。该研究就miR-21在STAT3信号通路上对肾母细胞瘤细胞生长迁移的相关机制进行研究。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1

细胞系 人肾母细胞瘤细胞系购自上海莼试生物技术有限公司，货号CS-011-0148。

1.1.2

主要试剂 miR-21模拟物及miR-NC购自江苏百奥迈科公司；hsa-mir-21、DMEM培养基(货号：1165-092)、胰蛋白酶(货号：25200-072)、胎牛血清(货号：10735078001)购自上海基免实业公司；Li-pofectamine2000转染试剂(货号：11668-019)、TRIzol试剂盒(货号：RG008)购自美国Thermo Fisher公司；Real-time PCR试剂盒(货号：E090)购自上海欣百诺生物公司；SDS-PAGE凝胶快速配置制试剂盒(货号：SJH0899)购自上海如吉生物公司。

1.1.3

主要仪器 Mx 3005P荧光定量PCR仪(美国Agilent公司)；凝胶成像系统 BioSenSC300(上海山富科学仪器有限公司)；GL20A 全自动高速冷冻离心机(湖南仪器仪表厂离心机厂)；MV-Ⅲ型小型单垂直板电泳槽、OS-Ⅰ型回旋脱色摇床、MV-Ⅱ型垂直板电泳槽(大连竞迈科技生物有限公司)；Y-ZCP3000 型电泳仪(北京君意东方电泳设备公司)。

1.2 病例……