长链非编码RNA PCAT-1对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响及作用机制研究

王继军，吴 凡，李瑶瑶，孔桂美，郁多男

胰腺癌是全球癌症相关死亡率的第三大原因，且胰腺癌的发病率和病死率仍在逐年增加。虽然胰腺癌的治疗手段随着医疗技术的进步取得了较大的进展，但是胰腺癌患者的预后仍然较差，其中位总生存期少于7个月，5年生存率仅为6%左右。长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncRNA)是一种长度超过200核苷酸的非编码RNA，研究表明lncRNA在肿瘤的发生发展中发挥重要作用。lncRNA前列腺癌相关转录本1(prostate cancer-associated transcript 1, PCAT-1)最初在前列腺癌中被鉴定，lncRNA PCAT-1的异常表达在越来越多的恶性肿瘤中被报道，其过表达与细胞增殖、侵袭、转移、存活、细胞周期、肿瘤耐药和同源重组等有关。Wang et al报道lncRNA PCAT-1在胰腺癌组织中表达上调，并促进胰腺癌细胞迁移和侵袭能力，但是lncRNA PCAT-1在胰腺癌中其它的生物学功能未知。该文研究了lncRNA PCAT-1对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响及作用机制，旨在获得lncRNA PCAT-1作为胰腺癌治疗潜在分子靶点的实验室依据。

1 材料与方法

1.1 主要实验试剂与材料

胰腺癌细胞系Capan-1、Capan-2、PANC-1、SW1990和正常胰腺细胞hTERT-HPNE(美国ATCC细胞库)。细胞培养基、胎牛血清、双抗和胰酶(美国Gibco公司)；Bestar 1Strand cDNA合成试剂盒(上海DBI®Bioscience公司)；TRIzol 试剂和SYBR Premix Ex TaqTM qRT-PCR试剂盒(日本TaKaRa公司)；PCAT-1 shRNA(上海吉凯基因化学技术有限公司)；3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑鎓[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium, MTS]试剂盒(北京百奥莱博科技有限公司)；细胞周期检测试剂盒(上海碧云天生物技术有限公司)；细胞凋亡试剂盒(南京凯基生物技术有限公司)；蛋白裂解液(北京索莱宝生物技术有限公司)；BCA蛋白浓度检测试剂盒(美国Thermo公司)；……