盐诱导激酶1过表达对高脂饮食诱导的肥胖大鼠肝脏脂代谢紊乱的调节机制

周 璞，付 薇，谢凌波，李 倩，邓稀予

肥胖作为一种最常见的营养障碍性疾病，与多种疾病关系密切。目前肝脏中脂代谢相关基因的表达与营养性肥胖的关系是研究热点之一。盐诱导激酶1(salt-inducible kinase 1，SIK1)是AMPK家族的一种丝氨酸/苏氨酸激酶，能在肝、肾、脂肪及心脏等多种组织中表达，具有广泛的生理作用，其中对哺乳动物糖尿病相关的糖脂代谢和高血压相关的水盐代谢平衡的调节作用是目前的研究热点。有研究提示，SIK1能够调节生酯基因固醇调节元件结合蛋白-c(sterol regulatory element binding protein-c，SREBP-1c)的表达及活性，进而调控肝脏中脂肪酸和三酰甘油(triglycerides，TG)合成来参与到脂质代谢中。虽然目前已经证实SIK1能够调控脂质的合成，但其具体的作用机制尚不清楚，该研究通过高脂饮食诱导肥胖大鼠，并通过尾静脉注射SIK1过表达质粒，来研究SIK1调控肥胖大鼠肝脏脂代谢紊乱的可能机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物

SPF级SD大鼠40只，3周龄，雌雄各半，体质量200～220 g，购自中国食品药品检定研究院[许可证号：SCXK(京)2014-0013]，所有SD大鼠均饲养在中国检验检疫科学研究院屏障环境动物房[SYXK(京)2014-0033]，培育室温度20～25 ℃，湿度保持在65%～70%，进行人工光照(12 h/12 h昼夜)，大鼠全天自由饮水。

1.2 主要试剂与仪器

高脂饲料(2.5%胆固醇、0.3%胆酸钠、20%蔗糖、20%猪油、57.2%标准饲料)购自北京阜康生物科技股份有限公司；慢病毒载体系统由pLenti-CMV-EGFP载体、psPAX2(gap/poly元件)载体、pMD2.G(VSVG元件)载体三质粒组成，购自上海泰冷生物科技有限公司；肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS)、白细胞介素-6(interleukin-6，IL-6)、IL-10酶联免疫吸附(ELASE)试剂盒购自南京建成生物工程研究所，批号：20170104、20170125、20170108、20170115；……