痰液标本细菌培养及药敏试验对下呼吸道感染用药的指导作用

韩志梅

下呼吸道感染是常见的呼吸系统疾病，由于近年来抗菌药物的广泛使用，导致病原菌耐药性逐渐上升，而随着病原菌的不断变迁，既往经验用药局限性逐渐凸显，在影响治疗效果的同时会进一步增加耐药性，不利于临床治疗。相关研究指出，通过痰液标本细菌培养及药敏试验可分析主要病原菌分布及对抗生素敏感度，有助于临床合理选择抗生素[1]。为分析本地区下呼吸道感染老年患者主要病原菌构成及耐药性，本研究收集患者痰液标本进行细菌培养及药敏试验，详情如下。

1.资料与方法

1.1 一般资料 选取我院2018年10月至2020年4月下呼吸道感染老年患者372例，其中男性201例，女性171例；年龄60～72岁，平均(66.03±2.75)岁。

1.2 选取标准 ①纳入标准：经检查确诊为下呼吸道感染；痰液培养标本未受污染；对本研究知情、签署同意书。②排除标准：近期经抗感染治疗；标本采集、培养过程出现交叉感染；合并其他呼吸系统疾病或其他慢性感染性疾病。

1.3 方法 标本采集：清晨取样，盐水漱口后用力咳出，注意避免受上呼吸道菌群污染，将样本置于无菌盒，30min内送检。标本合格标准：白细胞/上皮细胞>2.5。分离鉴定：将标本接种于嗜血巧克力平板、麦康凯平板、血琼脂平板，置入孵育箱进行培养，温度设置36℃，孵育18～24h后，再对分离出的致病菌进行涂片革兰染色和分纯培养，孵育完成后进行药敏试验。药敏试验采用MIC法，配置好0.5麦氏比浊浓度菌液，采用VITEK2 COMPACT 60全自动微生物鉴定系统进行病原菌鉴定及药敏试验。质控菌株：大肠埃希菌ATCC25922，肠球菌ATCC29212，金黄色葡萄球菌ATCC29213，铜绿假单胞菌ATCC27853。

1.4 观察指标 ①统计痰液标本细菌培养结果，分析主要病原菌构成。②分析药敏试验结果，统计主要革兰阴性菌及主要革兰阳性菌耐药性。

2.结果

2.1 主要致病菌构成 372例患者共分离致病菌435株，其中革兰阴性菌256株，占比58.85%，以肺炎克雷伯菌(24.14%)、大肠埃希菌(15.86%)、铜绿假单胞菌(11.72%)为主；革兰阳性菌109株，占比25.06%，以金黄色葡萄球菌(13.10%)、凝固酶阴性葡萄球菌(8.05%)为主；真菌70株，占比16.09%，主要为白色假丝酵母菌(14.71%)，见表1。

表1 主要致病菌构成

2.2 主要革兰阴性菌耐药性 肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌等主要革兰阴性菌对亚胺培南耐药性较低，见表2。

表2 主要革兰阴性菌耐药性

2.3 主要革兰阳性菌耐药性 金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌等主要革兰阳性菌对万古霉素耐药性较低，见表3。

表3 主要革兰阳性菌耐药性

3.讨论

呼吸道是人体与外界相通的重要组织，其中咽喉、鼻腔等上呼吸道组织中存在正常菌群，一般情况下呼吸道为无菌状态，但当人体免疫功能下降后易受病原菌入侵发生感染，通过准确诊断并合理分析对临床用药有指导作用。

痰液标本细菌培养是呼吸道感染治疗的重要方案，可为主治医师提供治疗依据。本研究痰液标本细菌培养结果显示，372例患者共分离致病菌435株，其中革兰阴性菌256株，占比58.85%，以肺炎克雷伯菌(24.14%)、大肠埃希菌(15.86%)、铜绿假单胞菌(11.72%)为主；革兰阳性菌109株，占比25.06%，以金黄色葡萄球菌(13.10%)、凝固酶阴性葡萄球菌(8.05%)为主；真菌70株，占比16.09%。与相关研究[2，3]存在一定出入，其原因在于不同地区、不同时期患者病原菌存在差异，进一步说明实施痰液标本细菌培养的必要性。

药敏试验是分析病原菌对不同抗生素耐药性及敏感性的主要方式，可避免由于经验药用药造成抗生素滥用，而造成耐药性上升。岑敏等[4]研究指出，不同年龄小儿感染率、细菌耐药性均存在明显差异。李英等[5]进一步指出，2013年至2015年小儿下呼吸道感染主要致病菌与既往存在明显差异，主要致病菌对抗生素敏感度有变迁趋势。因此，为进一步明确本地区下呼吸道感染患者主要病原菌耐药性，本研究对患者进行药敏试验，结果显示主要革兰阴性菌对亚胺培南耐药性较低，主要革兰阳性菌对万古霉素耐药性较低，提示对以革兰阴性菌感染为主的患者可选择亚胺培南为经验用药，对以革兰阳性菌感染为主的患者可选择万古霉素作为经验用药。肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌等主要革兰阴性菌对头孢他啶、头孢曲松、头孢吡肟、头孢噻肟等头孢类抗生素均有较高耐药性，原因可能为临床第二代、第三代头孢菌素使用广泛，甚至存在滥用现象，染色体或细菌质粒介导产生超广谱β-内酰胺酶，导致主要病原菌对新一代内酰胺类抗生素存在广泛耐药性。而存在超广谱β-内酰胺酶的菌株对内酰胺类抗生素敏感性均较低，包括氨曲南、青霉素等[6]。肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药性较低，提示革兰阴性菌对亚胺培南均有较高敏感度。李怡等[7]在分析2012年至2016年革兰阴性菌耐药性分析时指出，大肠埃希菌、肠杆菌、肺炎克雷伯菌均对亚胺培南具有较低耐药率，这与本研究结果一致。本研究中全部革兰阳性菌均对万古霉素无耐药性，因为万古霉素可有效抑制病原菌细胞壁及蛋白质合成，降低细胞膜通透性，但同时需注意，万古霉素不良反应较多，临床使用时不应作为首选，在其他抗生素效果不佳时应用既可降低对人体损害，又能避免万古霉素耐药性上升。有研究指出，万古霉素应用于革兰阳性菌为主的感染性疾病有确切效果，但治疗安全性与替考拉宁相比较差[8]。因此，临床应用抗生素时应充分考虑患者实际情况、耐受程度、不良反应等多种因素，及时检测血药浓度，提高用药安全性。

综上，下呼吸道感染患者主要致病菌构成为以肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌等为主的革兰阴性菌及以金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌为主的革兰阳性菌，通过药敏试验可分析主要病原菌耐药性，对革兰阴性菌感染患者可选择亚胺培南，对革兰阳性菌感染患者可在考虑用药安全性的基础上选择万古霉素。