β-榄香烯对高糖环境下人视网膜色素上皮细胞活力及血管内皮生长因子蛋白表达的影响▲

周 赟 陈 俊 李丽华 孙一洲 陈 蕾

(中国医科大学附属第一医院眼科，辽宁省沈阳市 110001，电子邮箱：zhyun929@163.com)

β-榄香烯是一种二类非细胞毒性的抗肿瘤药，从中草药香茅草中提取而得，毒副作用轻且抗肿瘤谱广，广泛应用于肺癌、消化道肿瘤及其他浅表性肿瘤的治疗[1-2]。研究证实，β-榄香烯可以通过两种途径抑制肿瘤细胞增殖：一是通过上调凋亡相关蛋白的表达，诱导肿瘤细胞发生凋亡[3-4]，二是通过抑制肿瘤细胞内血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)的生成，从而抑制肿瘤细胞生长转移[5]。许多血管性眼科疾病的视网膜中VEGF表达显著提高[6]，因此β-榄香烯是否可应用于眼科领域疾病的治疗成为研究热点。耿金等[7]的研究结果显示，β-榄香烯注射乳可以抑制氧诱导的新生血管模型小鼠视网膜新生血管的发生和发展。而β-榄香烯注射乳对糖尿病视网膜病变的治疗效果及其对高糖环境下人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium，RPE)细胞的作用鲜见研究报告。本研究将不同浓度的β-榄香烯作用于高糖环境下体外培养的人RPE细胞，分析β-榄香烯对高糖环境下人RPE细胞活力及VEGF表达的影响。

1 材料和方法

1.1 主要材料及试剂 人RPE细胞株ARPE-19(ATCC公司，批号：AC337713)，β-榄香烯(大连远大生物集团)，杜氏改良伊格尔培养基(Dulbecco′s modified Eagle medium，DMEM；海克隆公司，批号：SH30022.01B)，胎牛血清(海克隆公司，批号：SV30087.02)，胰蛋白酶(海克隆公司，批号：SH30042.01B)，MTS溶液(美国Promega公司，批号：CTB169)，人VEGF酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)检测试剂盒(达优公司，批号：CT579-10)，细胞培养板、培养瓶(康宁公司)。

1.2 细胞培养 取人RPE细胞株ARPE-19、在37℃、5% CO2的培养箱中，用含10%胎牛血清的DMEM培养基进行贴壁培养，用2.5 g/L胰蛋白酶对细胞进行消化传代，消化时间为2 min。……