IgM 类抗-N 引起交叉配血不合1 例分析

陈宝辉

(江苏省宿迁市钟吾医院 检验科，江苏 宿迁 223800)

0 引言

输血治疗是一项重要的临床治疗手段，在病员救治的过程中发挥着不可替代的作用，随着医疗水平的发展，输血安全已日益受到关注。临床输血前需要做ABO、RHD 血型复检及交叉配血试验，以保证供血者和受血者的血型一致且供受双方红细胞和血浆之间不存在抗原抗体反应，保证临床输血安全、有效。但实际工作中，往往会发生交叉配血不相合的情况，即主侧或次侧出现红细胞凝集。今对1 例用凝聚胺法及生理盐水法交叉配血时主侧不合但经微柱凝胶抗人球蛋白卡式法配血主次侧均相合的案例进行分析并探讨预防措施。

1 临床资料

患者苏某谋，男，76 岁，因股骨粗隆间骨折入住我院骨科，住院号1851420. 患者于2019 年11 月15 日手术，术前备悬浮少白细胞的红细胞4U，血型正定型为B 型RHD 阳性，反定型患者血清与Ac、Bc、Oc 的反应分别为4+、2+、2+，考虑为不规则抗体干扰遂用O 型红细胞对患者血清吸收后再次检测，正反定型一致，为B 型RHD 阳性。给以同型血进行交叉配血时主侧凝集(2+)，次侧阴性；凝聚胺法、盐水法两种方主侧均凝集，但微柱凝胶抗人球蛋白卡式法主次侧均不凝集，患者无输血史，否认其它重大疾病及传染病，适龄婚配，子女健全，为查明原因遂做进一步检查。

2 材料和方法

血清学检查试剂与方法：血型试剂抗A、抗B 及A、B 标准抗原反定型红细胞、不规则抗体检测试剂(人血红细胞)、微柱凝胶抗人球蛋白检测卡均由长春博讯生物技术有限责任公司生产；凝聚胺试剂由珠海(合资)贝索生物技术有限公司生产；抗D、抗C、抗c、抗E、抗e、抗M、抗N、抗P、抗H 及普细胞由上海血液生物医药责任有限公司生产；MN 型的B 和O 型红细胞由本实验室筛选献血者红细胞自制，以上所有试剂均在有效期内。血清学离心机为长春博研科学仪器有限责任公司生产。血型鉴定、唾液试验、不规则抗体筛查、抗体效价测定、吸收与放散试验等血清学技术均按《全国临床检验操作规程》第4 版[1]118--138 页及试剂说明书操作。

3 血清学检查结果

3.1用患者血清分别在生理盐水介质及微柱凝胶抗人球蛋白卡上做抗体筛查试验，凝集强度见表1，生理盐水介质中患者血清与OI、OII、OIII 不规则抗体筛查检测试剂(人血红细胞)均呈阳性反应，在微柱凝胶抗人球蛋白卡中患者血清与OI、OII、OIII 不规则抗体筛查检测试剂(人血红细胞)均成阴性反应。

表1 患者血清在生理盐水介质及微柱凝胶抗人球蛋白卡上抗筛试验凝集强度

3.2患者红细胞与标准抗血清及患者血清与标准红细胞在不同温度下生理盐水介质中的反应，反应结果及凝集强度见表2，患者血型为B,M,CCDEe，自身细胞对照试验在不同温度下均成阴性反应。

3.3唾液中A、B、H 物质测定 未测出A 物质，测得B 及H 物质效价分别为32 和16。

3.4患者血清在盐水介质中与1,3,4,5,6,8,9,10 号普细胞均成阳性反应，与2,7 号普细胞呈阴性反应，根据反应格局见表3，提示存在抗N。

3.5为进一步证实患者血清中抗N 的存在，将患者血清与不同的MN 的B 和O 型供血者红细胞在生理盐水介质中不同温度下进行反应，4℃和室温时患者血清与含N 抗原红细胞呈不同程度的凝集反应，37℃呈阴性反应，结果见表4，患者血清经稀释后室温测得抗N 效价1:32。为了确定抗体性质，将患者血清用2-me 液处理60min 后与N 抗原阳性红细胞反应，结果无论在盐水介质还是在微柱凝胶抗人球蛋白卡中都不凝集，说明该抗体属于IgM 类抗体，而非IgG 抗体。

表2 患者血型鉴定及自身细胞对照实验结果

表3 普细胞反应格局表

表4 患者血清与不同的MN 的B 和O 型供血者红细胞在生理盐水介质中不同温度下的反应凝集强度

3.6 吸收放散实验

患者血清用ON 细胞经4℃吸收1h 后，在56℃对ON 细胞进行放散，放散液可被ON 细胞凝集，吸收后的血清不再与ON细胞发生凝集，进一步证实患者血清中含N 抗体。

4 讨论

通过以上实验可知该患者血型为B,M,CCDEe，直抗阴性说明此抗体为同种抗体而非自身抗体。血清中除有抗-A 抗体外还含有抗-N，稀释后室温测得抗N 效价1:32，为确定此抗体性质，患者血清经2-me 液37℃处理60min 后，与N 抗原阳性红细胞在盐水介质和微柱凝胶抗人球蛋白卡中都不凝集，说明该抗体属于IgM 类抗体，而非IgG 抗体，从反应情况来看，其血清中抗N 在4℃和室温反应活性强，在37℃活性消失。本次配血所用的微柱凝胶抗人球蛋白卡式试验需37℃孵育15min，N 抗体为冷抗体，温度升高活性减弱，所以本次抗人球蛋白卡式法配血呈阴性反应。盐水配血法和凝聚胺配血法没有37℃孵育过程加之寒冷季节室温较低故呈阳性反应。

在MNS 血型系统中，血型抗体抗N 较抗M 少见，且多为IgM 型，可引起血型鉴定困难和交叉配血不合[2]。虽然抗N 活性在37℃时活性较小，但在临床输血过程中由于输血速度过快、输血量过大、环境温度较低、术中麻醉等原因可导致患者体温或局部体温下降，从而使抗N 活性升高，可引起严重的输血反应。发生冷抗体反应的温度范围对于临床症状的出现往往比冷凝集的程度更重要。本例患者男性，无输血史，子女健全，且为IgM 类抗体，考虑其血清中抗体应为非红细胞刺激天然产生的，筛选N 抗原阴性的献血者红细胞用生理盐水法、凝聚胺法及微柱凝胶抗人球蛋白卡式法交叉配血主次侧均无凝集，给予该患者输注，注意保暖，输血过程密切观察没有发生输血不良反应。

综上，在血型鉴定及交叉配血过程中，当正反定型结果与Landsteriner 规则不符时，应进一步进行血清学检验，应从不同角度思考，选择有价值的鉴别试验如复核血型、吸收试验、放散试验等多方面地排除、鉴定，也可采用分泌型测定、蛋白电泳分析、血型家系遗传学调查等[3]。血型鉴定单做正定型是不安全、不完美的，一定要加做反定型，且做反定型时一定要加做 O细胞，O 细胞对正确的血型鉴定 、发现不规则抗体及稀有血型等方面都有重要意义[4]。交叉配血主侧不合时，确认血型无误前提下要用多种方法进行配血如生理盐水法、抗人球蛋白法、凝聚胺法、酶法等，注意不同温度的反应强度，进行凝集强度比较，辨别冷抗体和温抗体，以便发现更多的不完全抗体，分析抗体性质，寻找解决对策，确保输血治疗的安全性和有效性，提升救治水平。输血工作任重而道远，严谨的工作作风，认真求实的精神才是尊重生命敬畏生命的体现。