钙敏感受体在大剂量瑞芬太尼诱导卵巢癌裸鼠心肌损伤中的作用机制研究

朱烨静 周惠丹 崔小英 钱琳艳 方军 姜慧芳 许宏亮

作为妇科恶性肿瘤中恶性程度最高的卵巢癌，约70%发现时已是晚期[1]。而卵巢癌根治术创伤大、时间长，使患者在手术及术后发生心血管不良事件的风险大大增加。瑞芬太尼作为起效迅速、镇痛效果确切的一种阿片类药物，既能确保手术过程中镇痛效果良好，又能在手术结束后迅速消散，但手术中大剂量长时间输注会出现心肌抑制的不良反应。有研究发现，大剂量瑞芬太尼能增加大鼠心肌氧化应激，且随着剂量的增加和输注时间的延长，心肌损伤程度也不断加重[2]。但目前对大剂量瑞芬太尼抑制心肌机制的研究甚少。因此，本研究旨在探讨钙敏感受体（calciumsensing recetor,CaSR）在持续大剂量输注瑞芬太尼诱导卵巢癌裸鼠心肌损伤中的作用机制及信号通路，以期为防治大剂量阿片类药物的心肌抑制作用提供有效的靶点。

1 材料和方法

1.1 实验动物和材料 Nc-nu裸鼠40只（6～8周，20～25 g）[中国科学院上海实验动物中心，许可证号：SCXK（沪）2016-2017]；瑞芬太尼（1 mg/支，国药准字：90A08061，湖北宜昌人福药业公司）；人卵巢癌细胞株SKOV3（广州富恒生物），CaSR 抗体（200 μg/支，美国 Cell Signaling公司）；蓬乱蛋白同源物（Dvl-1）抗体和βactin（1 mg/支，美国 Santa Cruz公司），β 连环蛋白（βcatenin）抗体（1 mg/支，美国 Santa Cruz公司）；CaSR 抑制剂 Calhex231（1 mg/瓶，美国 Santa Cruz公司）；蛋白裂解缓冲液（北京索莱宝公司）；蛋白酶抑制剂（PMSF）和辣根过氧化物酶（HRP）（上海碧云天公司）；肌酸激酶（CK）和乳酸脱氢酶（LDH）测定试剂盒（南京建成生物医学工程研究所）。

1.2 方法

1.2.1 动物分组和模型制备 将40只裸鼠按随机数字表法分为空白对照组（C组）、模型对照组（O组）、瑞芬太尼输注组（R组）和瑞芬太尼+CaSR拮抗剂Calhex231组（R+C组），每组10只。……