空腹条件下卡托普利片生物等效性研究

聂昌盛 赵 翔 崔 靖 陈仁燕

1.仁和堂药业有限公司，山东临沂 276600；2.翔宇药业股份有限公司，山东临沂 276023

高血压为临床上常见的慢性疾病，多选用药物进行血压控制，卡托普利吸收迅速，吸收率在75%以上，大部分经肾脏排泄，其中约50%以原形排出[1]，剩余为代谢物，血液透析时可将其清除，在体内很少蓄积，广泛用于治疗高血压。卡托普利是一种人工合成的非肽类血管紧张素转化酶抑制剂（ACEI），主要作用于肾素-血管紧张素-醛固酮系统（RAA 系统）[2-4]，具有良好的抗高血压作用。对于各种原发性高血压，具有起效快、远期疗效好等优点[5-6]，也常用于心力衰竭[7-8]和肾病[9]、糖尿病[10]的治疗。本研究主要评价卡托普利片受试制剂与参比制剂在健康受试者体内是否具有生物等效性，旨在为临床用药提供依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

2019年9～11月纳入24名中国成年健康受试者于郑州市中心医院进行卡托普利片受试制剂和参比制剂的生物等效性研究，按照随机数字表法将其分为R-T 组和T-R 组，每组12名。R-T 组中，男8例，女4例；年龄19～41岁，平均（31.0±8.020）岁；体重指数（BMI）19.7～25.6 kg/m2，平均（23.11±1.644）kg/m2。T-R组中，男8例，女4例；年龄18～46岁，平均（34.3±8.150）岁；BMI 19.3～25.8 kg/m2，平均（23.68±1.676）kg/m2。两组受试者的一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。本研究经郑州市中心医院药物临床试验伦理委员会审核及同意，所有受试者均知晓本研究情况并签署知情同意书。

纳入标准：①受试者年龄18周岁以上；②受试者中的男性体重应不低于50 kg，女性体重应不低于45 kg，BMI 在19～26 kg/m2范围；③受试者自筛选之日起至试验结束后6个月内无生育、捐精或捐卵计划，自愿采取有效的非药物避孕措施。排除标准：①既往或目前患有运动系统、神经系统、内分泌系统等慢性疾病或严重疾病，研究医生认为不适宜参加者；②受试者筛选前3个月内接受过手术，特别是接受过会影响药物吸收、分布、代谢、排泄的手术，或者计划在试验期间进行手术者；③受试者筛选前4 周内服用过任何处方药，或在筛选前2 周内服用过任何非处方药、维生素产品或中草药；④有过敏性疾患史或过敏体质者；⑤已知对卡托普利或其辅料中任何成份过敏者。

1.2 试验设计内容

研究采用空腹给药、随机、单剂量、两制剂、两周期、交叉试验设计，按照交叉给药方案。第一周期：T-R 组口服单剂量卡托普利片受试制剂（仁和堂药业有限公司，生产批号20190501），R-T 组口服单剂量卡托普利片参比制剂（Bristol-Myers Squibb S.r.l.，生产批号：AAP9604）。间隔5 d 清洗期后，第二周期：T-R 组口服单剂量卡托普利片参比制剂，R-T 组口服单剂量卡托普利片受试制剂。

受试者于每周期试验前1 d 入住Ⅰ期临床试验病房，受试者在试验前需禁食至少10 h。每周期服药当天，统一以温水240 mL 送服1片卡托普利片，服药前后1 h 内不得额外饮水。两个周期受试者在相同的预定时间点进食相同的标准餐，不摄取除此以外的饮食。

每名受试者分别于每周期服药前1 h 内（即服药后0 h）及服药后10、20 min、0.5、0.75、1.0、1.25、1.5、1.75、2、2.5、3、4、5、6、8、12、24 h 从前臂静脉采集血样，总计18个采血点，每次采血4 mL 至EDTA-K2 真空采血管，轻柔颠倒混匀，开始预处理，储存于-60℃及以下冰箱中，作为1份样本，以供药代动力学分析。本研究的每名受试者周期间隔5 d 清洗期后，体内药物均已经代谢完毕，第一周期药物不影响第二周期药物测定采集结果。本研究中，进行血样测定的受试制剂和参比制剂的样本数分别为24份。每名受试者血浆中卡托普利的浓度采用高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS，包括LC-20AD型高效液相色谱、TURBO V型电喷雾离子源、API 4000型检测器）[11-12]进行测定。

1.3 统计学方法

采用SAS 9.4 软件分析数据，对血药浓度进行非房室模型药代动力学参数的估算分析，计算主要药代动力学参数。采用置信区间法对卡托普利进行生物等效性判断，将主要药代动力学参数（Cmax、AUC0-t和AUC0-∞）对数转换后进行进行双单侧t 检验，同时计算Cmax、AUC0-t和AUC0-∞的个体内变异系数和把握度，计算两种制剂的主要药代动力学参数的几何均值比的90%CI 并进行等效性比较，Cmax、AUC0-t和AUC0-∞等效区间界值设定为80.00%～125.00%[13-14]。符合正态分布计量资料的均数用均数±标准差（）表示，不符合正态分布的改用中位数和四分位数间距[M（P25，P75）]表示。

2 结果

2.1 试验入组和完成情况

该研究入组受试者24例，完成24例。

2.2 受试者空腹服用卡托普利片后的血药浓度-时间曲线

受试者单剂量口服卡托普利片受试制剂和参比制剂25 mg后，血浆中卡托普利的平均浓度-时间曲线半对数图，见图1（封四）。

2.3 空腹状态下卡托普利片受试制剂与参比制剂的药代动力学参数

空腹状态下，卡托普利片受试制剂与参比制剂的药代动力学参数见表1，结果显示，卡托普利片受试制剂与参比制剂的体内过程一致。

表1 空腹状态下卡托普利片受试制剂与参比制剂的药代动力学参数

2.4 空腹状态下卡托普利片受试制剂与参比制剂的生物等效性评价

受试者在空腹状态下口服卡托普利片受试制剂与参比制剂后，血浆中卡托普利的主要药动学参数Cmax、AUC0-t和AUC0-∞的几何均数比值90%CI 见表2，结果显示，卡托普利的主要药动学参数Cmax个体内变异＜30%，不属于高变异药物。卡托普利在空腹状态下的几何均数比值90%CI 均落在80.00%～125.00%范围，说明卡托普利片受试制剂和参比制剂具有生物等效性。

表2 生物等效性评价结果

3 讨论

1981年卡托普利片最先由百时美施贵宝公司开发上市，适用于治疗各种类型高血压。因其良好的降压效果及不良反应少、用药安全性高等特点各企业争相仿制，一致性评价成为研究工作的重点，由于胃中食物可降低卡托普利的吸收，结合《以药动学参数为终点评价指标的化学药物仿制药人体生物等效性研究技术指导原则》[15]，因此本研究仅进行空腹状态下的生物等效性研究。

对卡托普利主要药代动力学参数Cmax、AUC0-t及AUC0-∞的对数值进行方差分析，以序列、周期和制剂作为固定效应，以个体（序列）作为随机效应，Cmax、AUC0-t、AUC0-∞的序列、周期和制剂无差异；Cmax、AUC0-t、AUC0-∞的个体（序列）有差异，两制剂在不同受试者体内的吸收代谢存在一定的差异，此种差异对生物等效性评价结果无影响。卡托普利半衰期短于3 h，口服后15 min 起效，1～1.5 h 达血药峰浓度，能持续6～12 h，所以在服药后每个试验周期设置18个采血点，包含吸收、分布、消除相，采样时间不短于3个末端消除半衰期，满足生物样品检测分析需求。由于卡托普利在血浆中不稳定，本实验研究中建立了快速、准确、方便可行的人血浆中卡托普利浓度测定法——HPLC-MS/MS，并通过方法学验证，最低定量下限（LLOQ）能达到10.00 ng/mL，符合血浆中卡托普利浓度检测要求。卡托普利片受试制剂和参比制剂的Cmax、AUC0-t和AUC0-∞个体内变异均小于30%，受试制剂与参比制剂主要药代动力学参数几何均值比值的90%CI 均在80.00%～125.00%，而且没有严重不良事件发生，可以判断两种制剂具有生物等效性。