LY3023414靶向抑制PI3K/AKT/mTOR信号转导诱导人皮肤基底细胞癌细胞凋亡

杨丽亚，刘彩玉

（恩施土家族苗族自治州中心医院，湖北恩施445000）

非黑色素瘤皮肤癌（Nom-melanoma skin cancer） 是导致人类死亡的主要原因之一，包括鳞状细胞癌和基底细胞癌[1-2]。根据统计调查发现，超过20%的人在一生中可能会患上皮肤癌，并且近十年来其发病率呈升高的趋势[3]。目前，皮肤癌的标准治疗方案包括手术、放疗和化疗，晚期皮肤癌患者预后并不理想[4]。因此，开发治疗皮肤癌的新型高效药物是很有意义的。

磷脂醇3-激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素的哺乳动物靶点（PI3K/AKT/mTOR）级联信号传导是研究较多的致癌/抗癌途径[5]。PI3K/AKT/mTOR途径的过度激活在皮肤癌和其他肿瘤生物学行为中都有发现，包括细胞存活、增殖、迁移、细胞凋亡、肿瘤转移、血管生成和转化[6-7]。于是，PI3K/AKT/mTOR信号系统是治疗及预防皮肤癌的一个潜在靶点，开发的一些PI3K/AKT/mTOR抑制剂已在临床前或临床肿瘤治疗中进行了研究[8]。

最新研究开发出的一种新型的、有效的、口服生物可用的PI3K/mTOR双向抑制剂（LY3023414），其还能阻断AKT信号传导[9]。本研究观察LY3023414对体外培养的人皮肤基底细胞癌细胞生长的影响及其作用机制。

1 材料及方法

1.1 一般资料

1.1.1 主要试剂 LY3023414购买于北京AdooQ Bioscience公司，其他PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制剂（纳巴霉素、OSI-027、MK-2206和渥曼青霉素）购买于上海 Selleck公司，Annexin V-FITC/PI和CCK8试剂盒购自江苏碧云天生物技术研究所，兔anti-Cleaved-caspase-3、兔 anti-CleavedPARP、兔 antip-P85（Y458）、兔 anti-P85、兔 anti-p-AKT（S473 and T308）、兔 anti-AKT、兔 anti-p-S6K（T389）、兔anti-S6K和兔anti-β-actin购自英国Abcam公司，Caspase-glot-3/9活性测定试剂盒购买于美国Promega公司，酶联免疫吸附试验（ELISA）单链DNA（ss DNA）试剂盒购买于武汉华美生物有限公司。

1.1.2 主要仪器 CY78-5型单人超净台（苏州华新空调净化有限公司）；……