丹参酮ⅡA对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及对JAK2/STAT3通路的影响

王 煜

缺血-再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury，IRI)是指缺血组织器官恢复血流后，不仅组织器官功能未恢复，反之，缺血进一步加重功能、代谢障碍和结构破坏，甚至出现不可逆。目前研究较多的是心肌缺血-再灌注损伤(myocardial ischemia/reperfusion injury，MIRI)，特别是老年人MIRI。IRI发生过程复杂，涉及多种病理生理过程，最终对心脏造成损害[1]。Janus激酶2(Janus kinase 2，JAK2)/信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3，STAT3)是一条重要的细胞内信号通路，涉及细胞增殖、分化、凋亡、自噬和炎症反应等过程，已有研究证明，其与MIRI密切相关[2-3]。有研究发现，通过激活JAK2/STAT3可发挥心肌细胞保护作用，减少凋亡[4-5]。丹参酮ⅡA(tanshinone ⅡA，TA)是从中药丹参中分离提取得到的一种脂溶性二萜醌类成分，具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤和抗心肌缺血等作用，且毒副作用较低。有研究表明，TA通过丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶/雷帕霉素靶蛋白(MEK/ERK/mTOR)通路改善肝脏IRI[6]；通过Toll样受体4/核因子κB(TLR4/NF-κB)通路改善缺血缺氧性脑病[7]；通过p38促丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路改善肾脏IRI[8]。Pan等[9]发现，TA通过改善炎症损伤和凋亡，增加自噬，从而改善大鼠MIRI并提高心功能。Li等[10]研究证实，TA通过激活磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)通路从而改善MIRI。为进一步明确TA对MIRI的影响及机制，本研究观察TA对老年MIRI大鼠及缺氧/复氧损伤(hypoxia/reoxygenation injury，HRI)心肌细胞的影响，并探讨JAK2/STAT3抑制剂AG490对心肌细胞的保护作用，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 实验动物、细胞与试剂 取24只健康老年雄性Wistar大鼠，18个月龄，体重(355.62±20.35)g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证号为SCXK(京)2006—2009。取出生48 h内的Wistar大鼠8只，分离原代心肌细胞，培养于含10%胎牛血清的DMEM培养基中，置于37 ℃、5%CO2恒温箱中培养。……