超声辅助浊点萃取-液相色谱-串联质谱法测定蔬菜中天然VK同系物

李凯龙，陈同强，徐文泱，李 涛，王亮亮，王 芳，孙桂芳

（食品安全监测与预警湖南省重点实验室，湖南省食品质量监督检验研究院，湖南 长沙 410111）

VK主要包括2-甲基-3-植基-1,4-萘醌又名叶绿醌（phylloquinone，PK）、甲基萘醌（menaquinone-n，MK-n）和甲萘醌（menadione，MD）[1-2]，PK和MK是VK的天然形式，而MD是一种用作药物的化学合成衍生物，但也有文献报道通过饮食摄入后，肠道细菌可以将PK分解为MD的现象[3]。VK不仅与凝血功能有关，而且与骨代谢有关，还被用于治疗恶性肿瘤、支气管哮喘等疾病，近年研究发现，VK缺乏的共同危险因素还包括膳食摄入量不足、吸收不良综合征（尤其是胆汁淤积性肝疾病）、抗生素治疗和肾功能不全等[4]。食物中最常见的VK是PK，它可由所有植物和绿藻产生，蔬菜的绿色强度一般也与PK含量有关[5]。虽然PK普遍存在于各种食物中，但PK的主要食物来源还是绿叶蔬菜和植物油。MK合成由肠道菌群中的细菌完成，其作用是细菌呼吸运输链中的电子载体[1]，所以MK主要存在于肉类、乳制品和发酵食品，如奶酪中，以四烯甲萘醌（menatetrenone 4，MK-4）、七烯甲萘醌（menatetrenone 7，MK-7）最具代表性[5]。

目前，食品中VK的检测方法主要有毛细管电泳法[6]、液相色谱-串联紫外检测法[5,7-8]或荧光检测法（需要衍生化步骤）[9-11]、液相色谱-串联质谱（liquid chromatography-tandem mass spectrometry，LC-MS/MS）法，离子源分为大气电压离子源（atmospheric pressure chemical ionization，APCI）[12-14]和电喷雾离子源（electrospray ionization，ESI）[15-18]，离子模式均为正离子模式。VK分析测定的食物基质主要为果蔬[5,12,14,16-17,19-20]、植物油[21-22]、奶制品和婴幼儿配方奶粉[13,15,23-25]。因VK不稳定，所以提取VK的前处理需避免影响稳定性的因素，如紫外线、碱性和酸性介质等。对于富含脂质基质的食品如牛奶等，还需增加水解步骤，确保脂质尽可能被皂化[13,25]或酶解消化去除[15]。……