佛山市中医院重症医学科痰液病原菌分布及耐药性分析

张小玲 吴 英 雷 蕾 李 瑶 陈家钖

广东省佛山市中医院检验医学中心，广东佛山 528000

重症监护病房（intensive care unit，ICU）收治的患者通常病情危重，免疫力低下，而各种侵入性操作较多，导致发生医院感染的危险性比普通病房患者高5～10倍[1-2]。下呼吸道感染是ICU常见感染性疾病之一，对患者生命健康造成极大威胁[3-4]。呼吸道感染的细菌种类及耐药性会根据不同地域和时间而发生变化。因此，为了解本院ICU病原菌感染的分布特点以及耐药情况，回顾性对佛山市中医 院2017年1月1日 至2019年10月17日ICU下呼吸道感染患者痰液标本的病原菌分布及耐药性进行分析，为临床医师合理用药提供充足依据。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 标本来源

选 取2017年1月1日 至2019年10月17日我院ICU下呼吸道感染患者，患者入院2 d内将痰液进行培养，对分离出病原菌进行回顾性分析，统计首次分离株。同一患者相同部位分离出相同病菌者，若药敏结果相同，则判定为同一菌株，不再重复纳入统计范围中。剔除同一患者同一部位分离的重复菌株。患者纳入标准满足以下④、⑤项加①～③任意两项：①体温＞38℃；②咳嗽、咳脓痰或气道有脓性分泌物；③白细胞计数增高；④肺部X线有浸润影，可伴有空洞；⑤起病于住院48 h、术后24 h、机械通气48 h后。

1.2 细菌培养和鉴定

合格痰液标本按《全国临床检验操作规程》第四版接种后放入CO2培养箱进行培养18～24 h。挑取可疑纯培养菌落进行细菌鉴定。

1.3 药物敏感试验

细菌使用全自动微生物药敏分析仪进行药敏试验（MIC），酵母样真菌使用纸片扩散法（K-B），按照美国临床实验室标准化协会（CLSI）当年最新版本标准判断结果。

1.4 仪器与试剂

VITEK MS质谱仪、Vitek 2 Compact全自动微生物药敏分析仪均为法国生物梅里埃公司产品；鉴定卡和药敏卡均为梅里埃公司配套产品。血琼脂平板、麦康凯琼脂平板、嗜血巧克力平板、念珠菌显色平板均购自迪景（广州市）微生物科技有限公司。

1.5 质控菌株

大 肠 埃 希 菌（ATCC25922）、铜 绿 假 单 胞 菌（ATCC27853）、金黄色葡萄球菌（ATCC29213）、白色假丝酵母（ATCC64548）、肺炎链球菌（ATCC49619）。

1.6 数据统计

应用WHONET 5.6统计学软件统计所有数据。

2 结果

2.1 常见病原菌分布及构成比

共分离出748株病原菌，其中革兰阴性菌579株，占77.41%；革兰阳性菌113株，占15.11%；真菌56株，占7.48%。见表1。

表1 病原菌的分布

2.2 主要病原菌对常用抗菌药物的耐药情况

2.2.1 革兰阴性菌对常用抗菌药物的耐药性 鲍曼不动杆菌对大多数抗菌药物的耐药率大于70.00%，其中对美罗培南、亚胺培南耐药率高达91.26%、93.20%；铜绿假单胞菌对多粘菌素B高度敏感，对美罗培南、亚胺培南的耐药率分别为36.41%、39.81%；肺炎克雷伯菌对亚胺培南耐药率为9.33%，对多粘菌素B高度敏感；大肠埃希菌对美罗培南、亚胺培南的耐药率均为0.00%。见表2。

2.2.2 革兰阳性菌对常用抗菌药物的耐药性 金黄色葡萄球菌对苯唑西林的耐药率达35.48%，未发现耐万古霉素、利奈唑胺的金黄色葡萄球菌。肺炎链球菌对青霉素敏感性高。见表3。

2.2.3 真菌对常用抗菌药物的耐药性 白假丝酵母菌对酮康唑、5-氟胞嘧啶的耐药率均为3.23%，对其他监测抗菌药物均高度敏感。见表4。

2.2.4 药敏实验结果分析 药敏实验分析表明，革兰阴性菌中鲍曼不动杆菌对复方新诺明、头孢哌酮敏感性高，肺炎克雷伯菌对阿米卡星与亚胺培南敏感性高，铜绿假单胞菌对妥布霉素、喹诺酮、头孢吡肟的敏感性高。见表5。

表2 主要革兰阴性菌对常用抗菌药物的耐药率

表3 主要革兰阳性菌对常用抗菌药的耐药率

表4 念珠菌属对常用抗菌药物的耐药率

表5 药敏实验结果分析（%）

3 讨论

下呼吸道感染是ICU中最常见的感染并发症，加重患者病情，严重时可危及患者的生命。随着广谱抗菌药物滥用现象的日益加剧，近年来ICU下呼吸道感染病原菌耐药性越来越强，治疗难度逐渐加大，相应多药耐药菌临床治疗难度很大，患者的病死率增加[5-6]。

本研究近3年共分离出病原菌748株，排前5位的依次是鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌及白假丝酵母菌。以革兰阴性菌为主，占77.41%，与国内相关报道[7-10]一致。革兰阳性菌和真菌分别占15.11%、7.48%，与张秀红等[11]报道的有所差异。

鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌是ICU最常见的非发酵菌，容易对碳青霉烯类抗菌药产生耐药性而引起院感暴发。此次研究分离率均为27.54%，同占首位。鲍曼不动杆菌对大多数抗菌药物的耐药率大于70.00%，其中对美罗培南、亚胺培南耐药率高达91.26%、93.20%。鲍曼不动杆菌分离率高、耐药性高的原因，可能与ICU环境中其定植率较高、呼吸机使用率高、碳青霉烯类药物的广泛使用[12-13]有关。铜绿假单胞菌对所监测抗菌药物的敏感性均较好，对美罗培南、亚胺培南耐药率分别为36.41% 、39.81%，对大多数抗菌药物保持了较好的敏感性。

肺炎克雷伯菌对生存繁殖的条件要求低，在自然界水、土壤和其他环境均可分离得到，是人类和动物呼吸道、肠道的定植菌，是医院感染最常见的机会致病菌之一[14]。由表2可知，肺炎克雷伯菌对亚胺培南、美罗培南耐药率分别为9.33% 、9.33%，对其他监测抗菌药物的耐药率均＜30.00%。随着耐碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌耐药菌株的逐年上升，肺炎克雷伯菌仍然是公共健康的严重威胁。大肠埃希菌对碳青霉烯类药物高度敏感，此次未检出耐碳青霉烯类药物的大肠埃希菌。

由表3可知，革兰阳性菌以金黄色葡萄球菌和肺炎链球菌为主。金黄色葡萄球菌对青霉素类抗菌药物的耐药率达83.87%，对红霉素、克林霉素、苯唑西林的耐药率达40.00%左右，未发现耐万古霉素、利奈唑胺的金黄色葡萄球菌。与相关文献[11]报道一致。肺炎链球菌为口腔和鼻咽部正常菌群，一般不致病。当机体抵抗力下降时，可引起大叶性肺炎或支气管肺炎。ICU分离的肺炎链球菌对大多数药物均高度敏感，可选用青霉素、万古霉素、利奈唑胺等。

ICU下呼吸道感染真菌分离率为7.48%。以白假丝酵母菌为主，占4.14%。由表4可知，白假丝酵母菌和非白假丝酵母菌所监测的抗菌药物敏感性高。

细菌耐药已成为我国临床工作中面临的严峻问题，由于抗菌药物的滥用，我国细菌的耐药率不断攀升，越来越多的多重耐药菌的出现，给临床抗感染治疗造成极大的困难[15]。近3年佛山市中医院重症医学科患者痰液标本分离菌以革兰阴性菌为主，耐药菌株呈上升趋势，大多数细菌呈多重耐药性。需加强病原菌检测及耐药性检测，根据病原菌的分布特点及药敏结果合理使用抗菌药物，减少耐药菌株的产生尤为重要。