CRABP1 过表达载体的构建及其对猪卵泡颗粒细胞凋亡的影响

吴夏梦，刘进辉，王 英，雷 磊，周展波，王水莲*，张虹亮*

（1.湖南农业大学动物医学院，湖南长沙 410128；2.长沙市雨花区动物卫生监督所，湖南长沙 410014）

维甲酸（Retinoic Acid，RA）又称视黄酸，是体内存在的具有生物活性的维生素A 衍生物[1]。视黄酸在体内具有生物活性的代谢产物主要包括全反式视黄酸（All-trans Retinoic Acid，ATRA）、9-顺式视黄酸（9-cis retinoic acid，9-cis-RA）和13-顺式视黄酸（13-cis Retinoic Acid，13cRA）3 种[2]。视黄酸具有广泛的生物学功能，可参与调节细胞增殖生长、诱导细胞分化和凋亡及抑制恶性肿瘤细胞生成等[3-4]。视黄酸结合蛋白1（Cellular Retinoic Acid-Binding Protein1，CRABP1）是一种高度保守的细胞体蛋白[5]，是细胞液中视黄酸分子与细胞核上视黄酸核受体互相作用的重要物质[6]，其表达非常广泛，几乎存在于各种组织细胞中。CRABP1基因在各种生物过程中都起着至关重要的作用[7]。前期研究发现，CRABP1 可参与胚胎小鼠心脏发育和小鼠脂肪前体细胞的分化调控[8-9]，在食蟹猕猴胚胎干细胞向神经干细胞分化的过程中CRABP1基因表达增加[10]。这些研究表明CRABP1 可能影响胚胎发育和细胞分化。CARBP1 主要功能是在胞浆中结合RA，限制其进入细胞核，在微粒体P450 氧化酶的作用下RA 可被氢化为水溶性无活性产物而丧失功能[11-12]。CRABP1 在RA 介导的细胞分化和增殖过程中起着重要的作用，被认为是RA 信号的重要调节因子[13-14]。但CRABP1 是否介导了ATRA 影响猪卵泡颗粒细胞凋亡尚不清楚。本研究旨在构建猪CRABP1 真核表达载体，并将其转染到猪卵泡颗粒细胞中，进一步研究CRABP1 能否介导ATRA 对猪卵泡颗粒细胞凋亡的影响，为研究CRABP1 在卵泡发育过程中的作用奠定基础。……