羊源霍氏肠杆菌的鉴定和生物学特性分析

张 玲，王 利*，魏 勇，张楠驰

(1.西南民族大学 青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部和四川省重点实验室，四川 成都 610041；2.四川省畜牧科学研究院 兽医研究所，四川 成都 610041)

霍氏肠杆菌(Enterobacterhormaechei)属于肠杆菌科(Enterobacteriaceae)，肠杆菌属(Enterobacter)[1]。霍氏肠杆菌为革兰阴性、短杆状、周生鞭毛、兼性厌氧，1989年独立成属，属于条件性致病菌[2-4]。目前，国内外对此菌的报道尚少，仅从狐狸[2]、牛[5]、林麝[6]、海龟[7]、白蚁[8]、瓜实蝇[9]等动物和人[4]中被分离鉴定出。霍氏肠杆菌对动物和人具有一定的致病性，主要危害有菌血症[1]、化脓性子宫内膜炎[2]、肺炎、化脓性疾病[10]和脑卒[11]等。CAMPOS等[12]鉴定出此菌引起早产儿血液感染。至今为止，在羊中尚未见霍氏肠杆菌的报道，本研究从患病山羊腹泻粪便样中分离鉴定到霍氏肠杆菌菌株ztl-01，并对其生物学特性进行研究，对防制霍氏肠杆菌导致的疾病有一定参考价值。

1 材料与方法

1.1 样品采自四川省某山羊养殖场的腹泻山羊粪便样品。病羊眼结膜充血、体温升高、四肢无力、呈现腹式呼吸并出现剧烈腹泻，粪便恶臭呈水样。剖检发现主要病理症状为肝脏和肾脏肿大并有很多出血点、大肠小肠充血、肠黏膜脱落、全身淋巴结普遍肿大充血。

1.2 主要试剂与仪器LB培养基购自青岛高科园海博生物技术有限公司；细菌基因组DNA提取试剂盒购自北京TIANGEN公司；药敏纸片、肠杆科细菌生化鉴定管均购自杭州微生物试剂有限公司；PCR仪购自Eppendorf Germany公司；凝胶成像系统、电泳仪均购自Bio-Rad公司。

1.3 细菌分离与鉴定在超净工作台内，无菌划线接种于LB固体培养基中，37℃恒温培养18 h，挑取外观一致的单菌落纯化培养、革兰染色和镜检。……