陈诣佳,胡笑宇,刘 希,杨文生,康政宇,何升东,张 林
胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)是胃肠道最常见的间质肿瘤,其表达的Ano1与GIST的生长增殖密切相关,可通过抑制胰岛素样生长因子结合蛋白5的表达,从而促进GIST生长增殖,同时也是GIST表达的一个敏感特异性标记物[1-2]。以往观念认为,GIST属于软组织肉瘤,对放射治疗不敏感[3],但其实在某些情况下放疗已被纳入GIST的多学科治疗策略。放疗作为手术的辅助手段,可能会抑制GIST对伊马替尼耐药性的发生,而且术前放疗有助于减少切除范围保留更多正常组织和更安全的剂量递增[4-5]。此外,在局部进行性或转移性GIST中,与放疗造成的毒性损伤相比,进行短期放射治疗对减轻具的局部症状更为有效[6-7]。最近十几年来,国外已有不少放疗在胃肠道间质瘤治疗中取得了明显效果的报道,但是目前尚未见对GIST放疗机制的基础研究报道。因此,本研究拟通过研究GSIT对电离辐射的敏感性,从而临床上GIST的放疗提供科学依据,为GIST放疗机制的研究奠定基础。
1.1 实验材料
1.1.1 细胞来源和培养 实验细胞为人胃肠道间质瘤细胞GIST-T1,由北京北纳创联生物技术研究院提供。细胞培养基为CM5-1,成分为89%McCoy’s 5A培养基+10%胎牛血清+1%双抗。细胞于37℃、含5%CO2的培养箱中培养,细胞贴壁生长,上皮细胞样,梭形,成块生长。
1.1.2 主要试剂及仪器 医用电子直线加速器(美国VARIAN公司),McCoy’s 5A培养基(美国Hyclone公司),胎牛血清(美国Sciencell公司),兔源Anti-TMEM16A多克隆一抗、山羊抗兔IgG H&L(HRP)二抗(英国Abcam公司),PAGE凝胶快速制备试剂盒(上海雅酶……