丹皮酚对强直性脊柱炎小鼠跟腱滑膜的影响

郑家春，熊正罡*，赵洋洋，蒋绪峰

（1.山东大学第二医院创伤骨科，山东济南250033；2.山东大学临床医学院，山东济南250033）

强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis,AS）是一种慢性的、由免疫介导的炎症性疾病。AS患者最终残疾的原因与病理性新骨形成机制密切相关，韧带、滑膜骨化以及附近组织纤维化是主要的病理基础［1］。研究显示骨化过程受到多种途径的调节，p38MAPK通路不但调节细胞的增殖和凋亡，也参与免疫炎性反应的调控［2］，研究显示p38MAPK会引起肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）-α为代表的炎性因子的大量表达，最终参与AS［3］。丹皮酚（paeonol,Pae）是在中药牡丹皮的根皮中鉴定出的药理活性化合物，最新的研究显示Pae可以有效的缓解AS模型小鼠的炎性反应，并缓解滑膜细胞损伤［4］，但是其具体功效和作用机制尚不清楚。本文主要分析Pae对AS小鼠模型跟腱组织及滑膜组织病理学变化的影响，并通过分析其对p38MAPK信号通路的影响探究作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物与分组

48只BALB/c小鼠，雄性，清洁级，（16.2±3.2）周龄，体重（20.3±3.2）g。随机分为4组，每组12只，分别为正常组、AS组、AS+阳性药组和AS+Pae组。

1.2 AS模型建立

根据参考文献方法建立AS模型［5］，建模方法简述如下：将100 μl的CFA和100 μl的PG混合，腹腔注射，分别在实验开始第0、3、6周进行注射，正常组腹腔注射等量的溶剂。

1.3 药物干预

AS+阳性药组在第7周使用柳氮磺吡啶（浓度为0.9 mg/ml）灌胃，剂量为 9 mg/（kg· d）。AS+Pae组使用Pae（浓度为0.3 mg/ml）灌胃，剂量为3 mg/（kg·d）。正常组使用溶剂（无菌水）灌胃，每日1次，连续干预3周。

1.4 检测指标与方法

1.4.1 ELISA检测

通过尾静脉采集血液样本，将血液样本2 000 rpm下离心20 min收集上层血清，按照ELISA说明书加入试剂，通过酶标仪检测吸光度，然后根据标准曲线计算TNF-α的浓度。……