利用IL-1A-eGFP慢病毒载体构建SASP细胞监测模型的研究

彭健愉,孙明轩,姚 琳,袁 源,刘肖雨,赵 威,林紫均,严詠恩,陈维春,刘新光,6,孙雪荣*

(1广东医科大学衰老研究所,东莞 523808;2广东省医学分子诊断重点实验室;3广东医科大学医学技术学院;4广东医科大学第二临床医学院;5广东医科大学药学院;6广东医科大学生物化学与分子生物学研究所;*通讯作者,E-mail:xuerongsun@126.com)

细胞衰老(senescence)是机体衰老的重要基础,与多种老年性疾病密切关联。衰老相关分泌表型(senescence-associated secretory phenotype,SASP)指衰老细胞出现分泌功能亢进,可分泌许多生物活性分子,包括细胞因子、趋化因子、生长因子及蛋白酶等,参与多种生理和病理过程,这些分泌因子统称为SASP因子。体内衰老细胞如未能及时清除,可导致SASP因子蓄积,从而引起慢性炎症,导致或加剧许多慢性疾病的发生。因此,寻找能调节SASP表达的药物,特别是SASP抑制剂,是目前衰老领域研究的热点之一。

建立荧光标记的SASP监测模型,将为筛选SASP抑制剂提供便利。Kang等[1]构建了一种监测细胞衰老的模型,该模型将绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的编码序列与细胞衰老相关基因miR-146a的启动子融合,并将其包装成慢病毒,感染人胚肺成纤维细胞IMR-90,从而通过绿色荧光监测细胞衰老,但此模型只能用于判断IMR-90细胞是否衰老,不能反映SASP的情况,且该细胞不能无限增殖,不适合大规模使用。因此,建立可无限增殖的SASP细胞监测模型,仍十分必要。

本课题组前期研究发现,黑色素瘤细胞受到顺铂处理后,可出现细胞衰老,并且表达多种典型的SASP因子[2]。与文献报道的SASP机制相符……