不同细胞标记物对大鼠牙髓干细胞体外标记的生物学影响

谢 娜,姬小婷,李子夏,唐成芳,陆 磊,王丹杨*

(1西安医学院口腔医学院口腔内科学教研室,西安 710021;2陕西中医药大学附属医院口腔科;3西安医学院口腔医学院口腔修复学教研室;*通讯作者,E-mail:kqwangdy@xiyi.edu.cn)

组织工程技术在临床中的应用是近年来很多学者研究的热点问题之一,由于干细胞具备多向分化的潜能,将干细胞移植在体内可用于机体各种组织修复以及组织再生,因而干细胞在临床中具有巨大的应用潜力[1-3]。

目前,利用干细胞进行活体移植后,干细胞在移植体内的归巢、分化机制是组织工程研究的重点问题,而对所移植的干细胞如何进行有效的标记以及示踪则是开展该项研究的前提[4]。

研究表明,氯甲基苯甲酰氨(氯甲基-1,1-十八烷基-3,3,3’,3’-四甲基-吲哚-羧花青-高氯酸盐,chlormethylbenzamido-1,1’-dioctadecyl-3,3,3’,3’-tetramethylin-docarbocyamine,CM-DiI)是一种亲脂性长链碳花青荧光染料,易与细胞膜结合[5,6]。4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(4’,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)能透过细胞膜快速进入活细胞中与DNA相结合。因此二者均可用于多种活细胞的标记[7,8]。

由于不同种属、不同来源的细胞生物学性能有所不同,因此对标记物的敏感程度可能也存在着一定的差异。本实验旨在对比CM-DiI和DAPI这两种不同的细胞标记物对大鼠牙髓干细胞生物学性能的影响,为进一步的动物实验提供理论支持,以及为需要进行细胞标记以及示踪的实验研究提供理论参考依据。

1 材料和方法

1.1 材料

选取2个月龄健康的清洁级Sprague-Dawley(SD)大鼠20只,均为雄性,体质量为(250±20)g,由西安交通大学医学院动物实验中心提供。

DMEM/F12培养基、胎……