丹酚酸B干预PI3K/AKT通路对STZ诱导大鼠胰岛细胞凋亡的影响

袁捷，王肃，姜云生，胡忠慧

（天津市第五中心医院内分泌科，天津 300450）

胰岛β细胞合成和分泌的胰岛素是维持人血糖稳态、新陈代谢、生殖、生理所必须的内分泌激素。在糖尿病的发生发展进程中，胰岛细胞的功能不断下降。不管是在糖尿病的发生机制中还是在糖尿病的进展过程中都会发生胰岛β细胞的凋亡。研究发现，不论是Ⅰ型糖尿病[1]还是Ⅱ型糖尿病[2]，患者胰腺内的胰岛细胞数量都会发生异常的减少。因此，如果能够有效阻止糖尿病患者胰腺内的胰岛细胞的异常凋亡，可延缓糖尿病进程。

丹酚酸B（SalB）是一种从唇形科植物丹参中纯化的天然产物，有抗氧化、抗炎、神经保护等[3-4]多种药理活性。有报道表明，SalB对胰岛细胞系的损伤有保护作用[5]，然而其作用机制尚不明确。本研究制备链脲佐菌素（STZ）损伤的大鼠胰岛团体外模型，考察SalB是否抑制STZ诱导的胰岛凋亡，并且进一步探讨PI3K/Akt通路在这一现象中的可能机制，为进一步将SalB开发为治疗糖尿病的药物提供基础研究的数据。

1 实验材料及方法

1.1 仪器 NU-4750E二氧化碳培养箱（美国NUAIRE公司）；TG16-WS/TG16WS台式高速离心机（中国湘仪集团）；Nikon Eclipse E600倒置荧光显微镜（日本尼康公司）；Bio-rad Gel Doc XR+凝胶成像系统（美国Bio-Rad Laboratories公司）。

1.2 药品与试剂 链尿佐菌素（STZ，Lot：WXBC2044V）、胶原酶 V（Lot No.SLBL6045V）购自 Sigma公司；荧光素二乙酸盐（FDA，Lot No.1028A025）活细胞染料、碘化丙锭（PI，Lot No.326C047）购自北京索莱宝科技有 限 公 司 ；TUNEL 凋 亡 检 测 试 剂 盒（Cat.NO：KGA7062，Lot：20171102）购自江苏凯基生物技术股份有限公司，Rat/Mouse Insulin ELISA试剂盒（96 test，Lot No.2707840）购自EMD Millipore 公司，兔抗大鼠 PI3Kβ 抗体（Lot：AG0933936），购自北京博奥森生物技术有限公司，兔抗Akt抗体和兔抗Phospho-Akt（Ser473）抗体（Lot#2854035）购自 Cell Signaling Technology公司；……