乔双梅
青海省大通县景阳镇岗冲畜牧兽医站,青海大通810105
羊乳房炎是一种多发性疾病,主要表现为患病母羊乳房潮红、发热、肿硬和疼痛,严重影响母羊的泌乳性能。临床上,最常见致病原因是多种病原菌侵入母羊乳房内部引起乳房炎,而在羊乳房炎病原菌总数中,链球菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌这3种病原菌所占比例最高。本试验对1 株羊乳房炎源大肠杆菌进行分离鉴定,同时采用纸片法对该菌株进行药物敏感试验,以期为该地区羊临床型乳房炎的预防和治疗提供有益参考和依据。
1)病料来源。采自青海省大通县景阳镇某羊场的临床型乳房炎患羊乳样。采集时先消毒乳头,将前5~10 mL 羊乳弃掉后无菌操作取乳样。
2)主要试剂、仪器设备和试验动物。鲜血琼脂培养基、麦康凯培养基、营养肉汤培养基、伊红美兰、细菌微量生化反应管、革兰氏染液;12 种抗菌药物纸片;恒温培养箱、光学显微镜、游标卡尺;SPF 小白鼠6 只,雌雄各3 只,18~20 g/只。
1)菌株的分离培养。将采集的乳样接种在鲜血琼脂培养基(50 mL/L)上,37 ℃恒温培养箱中培养24 h 后察看细菌生长情况,将菌落接种于麦康凯培养基上继续纯化培养,选择典型单菌落涂片、革兰氏染色和镜检,观察菌体形态、染色特性,再将单菌落接种在伊红美兰培养基培养和鉴定,同时接种到鲜血琼脂平板,察看其溶血现象。
2)生化鉴定。采用细菌微量生化反应管并参照《伯杰氏细菌鉴定手册》,实施生化鉴定和生化培养,将疑似大肠杆菌的菌株接种到各细菌微量生化反应管中,在37 ℃条件下培养48 h 后观察试验结果。……