麦冬多糖对转化生长因子-β1 诱导的人胚胎肺成纤维细胞表型转化的影响

郑凌歆 王金丹 何超翔 郑兰芝

特发性肺纤维化是一种以肺成纤维细胞增殖、细胞外基质过度聚集及肺泡上皮损伤为特征的间质性肺疾病[1-2]，发病机制未明，愈后差，缺乏有效的预防和治疗方法。目前认为成纤维细胞向肌成纤维细胞分化在纤维化进程中起至关重要的作用，其分化的标志是α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）的大量表达[3]。研究发现，转化生长因子-β1（transforming growth factor，TGF-β1）可诱导成纤维细胞向肌成纤维细胞分化[4]，并可通过Smads信号通路调控纤维化进程[5]。因此，药物若能干预成纤维细胞向肌成纤维细胞分化的进程，则可为特发性肺纤维化的治疗提供新思路。麦冬具有养阴生津、润肺清心的功效。麦冬多糖（Ophiopogon japonicus polysaccharides，OJP）是其主要化学活性成分，主要药理作用为免疫调节、抗炎及降血糖等[6]。研究表明，麦冬注射液可有效抑制腹膜间皮细胞TGF-β1 及肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor，TNF-α）的过度表达，从而阻止或延缓腹膜纤维化的发生[7]，具有一定的抗纤维化作用。本研究观察OJP 对TGF-β1诱导的人胚胎肺成纤维（HEL）细胞表型转化的影响及初步机制进行探讨，报道如下。

1 实验材料

1.1 细 胞 HEL 细胞购自中国科学院昆明细胞库（KCB 86019）。

1.2 主要试剂及仪器 OJP（纯度98%，购自上海融禾医药科技发展有限公司），TGF-β1（购自艾美捷科技有限公司，4342-5），α-SMA（购自Abcam 公司，ab5694），胶原蛋白Ⅰ（COLⅠ）抗体（购自戴格公司，db517），Smad2、p-Smad2 抗体（购自Cell signaling technology 公司，5678S，3101S），胎牛血清（购自Gibco 公司，1903220），CCK-8（购自碧云天生物技术公司，C0037），CFX 96 Touch 实时荧光定量PCR 仪（美国伯乐），TS-1000 脱色摇床（海门其林贝尔仪器公司），Bio-RadMINI-P 垂直电泳系统（美国伯乐），S-3000N 扫描电镜（日本日立），AIR 激光共聚焦显微镜（浙江赛因）。……