罗兰,熊颖,国奥,陈春意,夏韵,李靖凡,卢清,柯剑娟
武汉大学中南医院麻醉科,武汉 430071
过去十年,由于药物洗脱支架技术的进展[1],短期内血管内再狭窄发生率逐年下降,但继发的支架内再狭窄发生率上升[2]。有研究发现,药物洗脱支架破坏了内皮的功能和完整性,不利于内皮再生,从而造成内皮持续性炎症、内皮化不完全、动脉愈合延迟,形成继发的血栓相关血管内狭窄[3-4]。血管内膜增生过度亦可限制管腔血流,导致血管再狭窄[5]。白藜芦醇(resveratrol,RSV)是一种天然的植物多酚,具有抗癌、抗氧化、抗炎和抗过敏等多种有益特性[6-9]。RSV可将细胞阻滞在G1~S期,以剂量依赖的方式抑制平滑肌细胞(smooth muscle cell,SMC)增殖[10],加速SMC凋亡[11],最终减轻血管壁增厚引起的再狭窄。有研究报道,RSV在体外培养的人主动脉和肺动脉内皮细胞中可以时间和剂量依赖的方式抑制内皮细胞的增殖[12],但关于其对受损血管内皮的修复作用研究较少。本研究采用颈总动脉球囊损伤大鼠模型,通过损伤段局部给药的方式观察体内环境下RSV对内皮及整个血管的修复作用。
1.1 主要试剂及仪器 RSV(纯度≥99.8%)、F-127 Pluronic固体凝胶、DMSO溶液、4%多聚甲醛缓冲液购自上海碧云天生物技术有限公司;苏木精染液、BCA蛋白质浓度测定试剂盒(Ba1086)购自武汉百仟度生物科技有限公司;DAB显色试剂盒购自江苏世泰实验器材有限公司;小鼠抗CD31一抗(ab24590)购自英国Abcam公司;HRP标记的山羊抗小鼠二抗(5220-0341)购自美国SeraCare公司;兔抗人血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)单克隆抗体(19003-1-AP)购自美国Proteintech公司;……