张冬丽,付瑞芳,孙桂霞
(河南大学淮河医院妇科,河南 开封475200)
宫颈癌是导致女性死亡的主要恶性肿瘤之一,早期治疗以手术为主,中晚期辅助放化疗治疗。由于手术切除创伤较大,严重影响子宫功能,存在生育隐患,放化疗费用昂贵且常伴有多种并发症,治疗效果不甚理想[1]。氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)是一种从苦豆子、苦参和山豆根等药用植物中提取的喹嗪啶类生物碱,具有抗氧化、抗炎、抗病毒和抗纤维化等广泛药理作用,不良反应发生率低,安全性高,可通过改善细胞增殖与凋亡之间平 衡,缓 解 疾 病 发 展[2]。已 有 研 究[3-4]证 实:OMT具有抗肿瘤作用,对结肠癌和肝癌等肿瘤细胞具有一定杀伤作用,可应用于临床辅助抗癌治疗。OMT对宫颈癌细胞增殖具有抑制作用[5],但其具体作用机制尚不明确。本研究通过探讨OMT对宫颈癌细胞增殖和凋亡的作用及其可能机制,为临床开发利用OMT治疗宫颈癌奠定实验基础。
1.1 细胞、主要试剂和仪器 人宫颈癌SiHa细胞购自中国科学院上海细胞库。OMT(≥98%)购自上海禾午生物科技有限公司,噻唑蓝(MTT)、二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)和Hoechst33258购自美国Sigma公司,AnnexinⅤ-FITC/PI凋亡检测试剂盒购自江苏凯基生物技术股份有限公司,兔抗人β-连环蛋白(β-catenin)一抗购自美国Affinity公司,兔抗人细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、B细胞淋巴瘤2(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)、Bcl-2相 关X蛋 白(Bcl-2 assaciated X protein,Bax)一抗和HRP偶连的二抗均购自美国Abcam公司。FACSCalibu流式细胞仪系统购自美国BD公司,ELX800全自动酶标仪购自美国Biotek公司,DYCP-31DN电泳仪购自北京六一仪器厂。
1.2 细胞培养 SiHa细胞复苏后,接种于含体积分……