不同保护剂对大鼠肾脏冻融法脱细胞的影响

罗嗣昌，胥义

上海理工大学生物系统热科学研究所，上海200093

前言

器官移植已成为治疗器官疾病末期最有效的方法之一，每年都能拯救无数的患者。但当前供体器官不足的共性问题导致许多患者在等待供体过程中死亡［1］。另外，异体移植也可能因免疫系统的反应，致使移植患者需要长期服用免疫抑制剂［2］。随着组织工程和再生医学的发展，利用干细胞与器官支架再生器官可能能够成为器官移植的来源［3‐4］。Meezan等［5］首先提出去污剂脱细胞的方法，并证实脱细胞后的细胞外基质能保留超微结构的不溶性成分。Ott等［6］通过在脱细胞大鼠肾脏接种干细胞构建具有一定功能的肾脏，让再生肾脏作为供体器官成为可能。脱细胞支架已将细胞及DNA 等物质洗脱干净，再生器官后能够避免肾脏移植所引发的免疫抗原反应［7‐9］。

常用的脱细胞方法有洗脱剂洗脱法［10］、酶处理法［11］、冻融法［12］等。离子型洗脱剂SDS对细胞的洗脱效果较好，但同时会将肾脏内的许多其他物质一起洗脱，造成细胞外基质各成分的损失［13］；非离子型洗脱剂Triton‐100对细胞外基质的损伤较小，但细胞的洗脱效果不佳，很难将肾脏内部的细胞成分完全洗脱干净［14］。酶解法利用生物酶进行洗脱工艺处理，但研究表明，尽管酶解法能够特异性去除细胞中DNA等成分，其单独洗脱效果不好［15］。冻融法脱细胞利用冻融过程溶解细胞，再通过洗脱剂进行细胞的洗脱。冻融法能更有效地溶解组织和器官内的细胞，冻融过程不会显著增加组织中细胞外基质蛋白的损失［12］。……