Scara3介导巨噬细胞对多壁碳纳米管摄取和炎症细胞因子产生的影响

王 琼，何佳丽，王其其，赵子悦，徐结苟

人工合成纳米材料(engineered nanomaterial, ENM)进入机体后产生炎症等异物反应。巨噬细胞对颗粒性异物的吞噬作用是一个重要防御机制。巨噬细胞的病原微生物吞噬有两种基本方式：① 巨噬细胞膜上的模式识别受体介导的吞噬；② 调理吞噬，即巨噬细胞膜上的FcγR或补体受体介导的吞噬。ENM在体液中其表面吸附了多层蛋白质，其中包含IgG和补体，通过它们的调理作用从而促进巨噬细胞的吞噬。

多壁碳纳米管(multi-walled carbon nanotubes, MWCNT)是一种新型纳米材料，具有良好的应用前景，但在动物实验中其具有炎症、纤维化和恶性肿瘤等肺部毒性。该课题组前期研究表明刺激小鼠巨噬细胞Raw264.7清道夫受体A成员3(scavenger receptor A member 3，Scara3)表达增高，该研究将深入探讨Scara3在巨噬细胞对 MWCNT的摄取和炎症细胞因子产生中所起的作用。

1 材料与方法

1.1 试剂与仪器

纳米材料MWCNT购自三井化学有限公司；SiO购自美国Sigma-Aldrich公司；TiO购自日本化妆品协会；富勒烯C60购自日本先端碳材料株式会社；TRIzol试剂购自广州美基生物科技有限公司；HiScript® Ⅱ QRT SuperMix for qPCR试剂盒、AceQ® qPCR SYBR Green Master Mix试剂盒和2×Rapid Taq Master Mix试剂盒均购自南京诺唯赞生物科技股份有限公司；siRNA、shRNA质粒均购自上海吉玛基因有限公司；抗Scara3抗体购自美国Novusbio公司；抗Gapdh抗体购自美国Peprotech公司；电化学发光显影液(ECL)购自赛默飞世尔科技有限公司；X-VIVO巨噬细胞无血清培养基购自比利时Lonza公司；ELISA试剂盒购自上海酶联生物有限公司。

Polytron PT1600 E匀浆器购自瑞士Kinematica公司；JY92-2超声粉碎仪购自宁波新芝生物科技股份有限公司；LightCycler 96定量PCR仪购自美国Roche公司；NEPA21高效基因电转仪购自日本NEPA GENE公司；……