miR-513a-3p在结肠癌中高表达并诱导细胞生长和迁移的机制研究

缪作华，刘素云，李 丹

结肠癌(colorectal cancer，CRC)是全球第三大常见癌症，也是常见的癌症相关死因之一。既往研究表明，肿瘤抑制基因的失活和致癌基因的激活均有可能导致CRC发病，这些功能基因被很多分子调控，比如多种MicroRNAs(miRNAs)在CRC发病中发挥着重要的作用。miRNAs是一种长度在19～24个核苷酸之间小型的非编码RNA，通过与靶蛋白mRNA3′端非编码区(3′-UTR)结合，导致靶蛋白翻译抑制，靶蛋白可影响细胞的生物学作用，因而miRNAs在细胞生长、增殖、凋亡和分化等多种生物学过程中发挥着重要作用。miR-513a-3p作为miRNAs中一员，被证实介导了多种肿瘤增殖。关于CRC与miR-513a-3p相关报道较为少见，其作用机制也尚未明确。因此，该研究通过观察CRC患者癌组织与肺癌组织miR-513a-3p的差异，证实CRC发病与miR-513a-3p异常表达的关系，再用人CRC细胞株HT-29和SW480细胞进行体外实验，初步探究miR-513a-3p对CRC细胞生长和迁移的诱导机制。

1 材料与方法

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1 病例资料

收集2018年10月—2019年4月在该院确诊为CRC患者的CRC组织及癌旁正常组织30例作为研究对象，男女比例为17∶13，年龄为(58.32±12.47)岁。入选条件：术前未接受放射性治疗、化疗或者药物治疗。手术切除CRC变组织和临近非癌变组织，各选取1～2 cm漂洗干净后放置于4%多聚甲醛中固定，其余部分液氮中速冻留用。实验中所涉及的患者均经本人或家属同意，并签署知情同意书，且经医院伦理委员会审核后实行研究。

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2 试剂与仪器

人CRC细胞株HT-29(HTB-38)和SW480(cl-228)购自美国菌种保藏中心ATCC；miR-454-3p探针由上海吉玛制药技术有限公司构建；10%胎牛血清购自上海前尘生物科技有限公司；胃蛋白酶购自深圳市文乐生物科技有限公司；……