亚硒酸钠对肺癌细胞生物学行为的影响及其相关机制研究

许 晓，李 明，范理宏

硒是地壳中普遍存在的一种非均匀分布的金属，在人体生长发育过程中发挥着十分重要的作用。同时有大量研究显示硒具有抗癌、抗氧化、增强人体免疫力、调节蛋白质合成的功能，在人体的发病机制与稳态中扮演着重要角色，它与威胁人类健康和生命的多种疾病，如癌症、心血管疾病、多囊卵巢综合征等密切相关。与此同时还有研究表明硒可以减轻伊立替康、环磷酰胺等放化疗药物的毒性作用，改善患者预后。亚硒酸钠是最常见的无机硒的存在形式，有研究表明它可以影响肝癌、乳腺癌、膀胱癌等多种癌细胞的增殖、凋亡和迁移。肺癌是对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤，但关于亚硒酸钠抗肺癌的研究较少且具体机制不明确。该研究通过体外实验，研究亚硒酸钠对肺癌A549细胞系增殖、迁移的抑制作用以及初步验证亚硒酸钠促进凋亡的具体作用机制。

1 材料与方法

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1 试剂与仪器

亚硒酸钠(sodium selenite)购自美国Sigma-Aldrich公司；NF-κB抑制剂(BAY11-7082)购自美国MCE公司；RPMI 1640 培养基购自美国Gibco 公司；Annexin V-FITC/PI凋亡试剂盒购自美国Thermo Fisher Scientific公司；NF-κB激活-核转运检测试剂盒和IkBα、p-IkBα、Bax、Bcl-2抗体均购自上海碧云天生物公司；NF-κB、p-NF-κB、β-actin抗体均购自美国Cell Signaling 公司。由上海生物工程技术服务有限公司设计合成Bcl-2、Bax引物；mRNA提取试剂盒、逆转录试剂盒、SYBR Green qPCR Master Mix均购自美国EZBioscience公司；蛋白裂解液(RIPALysis Buffer)、BCA 蛋白定量试剂盒、CCK-8试剂盒均购自上海翊圣生物有限公司。

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2 细胞培养

肺癌A549细胞购自上海中国科学院细胞培养库，在含有10%胎牛血清和1%青霉素-链霉素的RPMI 1640培养基中培养并置于37 ℃、5% CO的恒温培养箱中培养，2 d更换1 次培养基。……