副猪嗜血杆菌对小鼠的致病性探究及感染模型的建立

宋晓明，李佃场，林佳旭，宋 杰，王 森，张洪亮，秦晓冰，单 虎

（1.青岛农业大学动物医学院，山东省新兽药创制协同创新中心，山东青岛 266109；2.乳山市行政审批服务局，山东乳山 264500 3.即墨区畜牧业发展服务中心，山东青岛 266200）

副猪嗜血杆菌病，又称格拉塞尔氏病，是由副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis，HPS）引起的，以猪的多发性浆膜炎、纤维素性胸膜炎、脑膜炎、腹膜炎、心包炎和关节炎等多器官病变为特征的细菌性传染病[1-2]。该病在各年龄段猪群中均有发生，断奶和保育仔猪比较易感，5～8 周龄仔猪发病率为10%～15%，发病严重的养殖场死亡率达50%以上。该病呈世界性分布，危害范围较广。目前猪群病原复杂多变，病毒与细菌多病原混合感染情况严重，HPS 作为一种主要的继发病原，给国内外养猪业带来较大经济损失[3-5]。

根据琼脂扩散（kieletein-rapp-gabriedson，KRG）血清分型方法，HPS 可分为15 种血清型[6-7]。不同地区流行的HPS 血清型不同，菌株间毒力差异较大。在我国，主要流行血清4 型、5 型、12 型和13 型菌株。因血清4 型、5 型在我国流行分布范围最广，毒力较强，因此多被选作HPS 感染模型最适菌株[8-11]。从现有研究进展来看，该菌致病机理较为复杂，因此建立一种成本低且稳定可靠的感染动物模型对于HPS 研究至关重要。

本试验对HPS 血清4 型、5 型的6 种菌株进行昆明系（KM）小鼠致病性分析，选取最适菌株最适剂量对小鼠进行腹腔注射，将死亡小鼠的临床症状、病理变化与HPS 猪体试验进行对比，然后进行细菌分离鉴定、PCR 鉴定，建立KM 小鼠感染模型。

1 材料与方法

1.1 菌株

从山东、河北、福建、广东、江西5 省分离到的6 株HPS，编号分别为SD-05、ZC-7、ND-21、BD-1、HB-08、PZ-26。……