甲泼尼龙对高糖腹膜透析液诱导人腹膜间皮细胞表达纤维化相关细胞因子的影响

蔡家驹，戴卫波，吴惠妃，叶秋明，萧俊祺

中山市中医院临床药学室，广东中山，528400

腹膜透析（PD）是终末期肾病（ESRD）患者首选的肾脏替代治疗方法之一，然而，PD 常用的高浓度葡萄糖腹膜透析液（PDS），由于具有明显的生物不相溶性，长期应用可致人腹膜间皮细胞（HPMCs）损伤，增殖受抑，并产生炎症因子和促纤维化因子，促进细胞外基质（ECM）增生及上皮间充质转化（EMT），从而引起腹膜纤维化（PF）［1］。目前对此仍缺乏有效的防治方法。甲泼尼龙（MP）属于糖皮质激素（GCs），具有良好的抗炎、抑制成纤维细胞增生及拮抗胶原合成等作用，可用于治疗以增生为主的慢性炎症，如特发性腹膜后纤维化、肺间质纤维化。但关于MP在PF中的应用研究鲜有报道。为了探讨MP 潜在的抗PF 机制，本研究观察了MP 对HPMCs在高糖PDS孵育下的增殖活性及其所表达的一系列细胞因子影响，包括活性氧（ROS）、白细胞介素6（IL-6）、核转录因子（NF-κB）、转化生长因子 β1（TGF-β1）、结缔组织生长因子（CTGF）、血管内皮生长因子（VEGF）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、透明质酸（HA）、Smads 蛋白等，以其为PF 治疗提供新的思路和方向。

1 材料与方法

1.1 材料 细胞与药物：人腹膜间皮细胞（HPMCs）购自广州博奥新生物科技有限公司；4.25%葡萄糖腹膜透析液购自广州百特医疗用品有限公司；甲泼尼龙（abs47047661）购自爱必信（上海）生物科技有限公司。主要试剂：DMEM 培养基（C12430-062）、胎 牛 血 清（C2027050）、TRIzol（10296-028）、SYBR GREEN qPCR Super Mix（C11733046）购自 Invitrogen 公司；RPMI1640 培养基（SH30809.01B）购自 Hyclone 公司；CCK-8 试剂盒（CK04）、MTT 溶液（M1025）购自北京索莱宝科技有限公司；PCR引物（上海生工生物工程股份有限公司合成）；BCA 法蛋白含量检测试剂盒（KGPBCA）购自南京凯基生物发展有限公司；……