miR-506对前列腺癌细胞增殖和转移的作用研究〔1〕

叶韬，李成文，高加胜，张海峰，李志坚

(九江市第一人民医院，江西 九江 332000)

前列腺癌是男性泌尿生殖系统中最为常见的恶性肿瘤之一。美国2018年估计新发164 690 例，死亡294 301 例[1]。我国男性前列腺癌发病率虽然较欧美国家低，但是由于人口老龄化、生活方式与饮食结构改变等原因，近年来呈现明显上升趋势[2]。研究[3]表明雄激素受体(AR)会促进前列腺癌的进展，AR的表达受DNA甲基化、蛋白泛素化以及MicroRNA(miRNA)等影响。MicroRNA是一类长度为19～24个核苷酸的非编码小RNA，具有发夹样茎-环结构，可参与调控mRNA的表达，多种重要的生物学过程(包括细胞增殖、凋亡、发育、分化和代谢)与miRNA密切相关[4]。最近研究[5-7]表明miR-506在结直肠癌、神经母细胞瘤、骨肉瘤等进展中扮演重要角色。本研究拟通过转染miR-506 mimic观察前列腺癌细胞增殖、迁移能力的变化，进一步研究miR-506在前列腺癌中的作用，为前列腺癌提供新的治疗策略。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞

人前列腺癌细胞系LNCaP，C4-2，22Rv1，PC-3及Du145细胞为本实验室保存。

1.1.2 主要试剂和仪器

胰蛋白酶(Gibco公司，货号25200056)，二甲基亚砜(DMSO，Sigma公司，货号D2650)，Lipofectamine TM 2000试剂(赛默飞公司，货号11668019)，DEPC水(Invitrogen公司，货号AM9906)，Trizol试剂(天根生化科技有限公司，货号15596026)，cDNA逆转录试剂盒(赛默飞公司，货号12574018)，蛋白标准品(Thermo公司，货号69385)，聚偏二氟乙烯(PVDF)膜(Millipore公司，货号88520)，鼠抗AR(Abcam公司，货号ab133273)，甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)单克隆抗体(Abcam公司，ab181602)，胎牛血清(Sigma公司，货号1270548)，RPMI-1640培养基(Gibco公司，货号22400105)。miR-506 mimic及阴性对照均购于广州市锐博生物科技有限公司(货号miR10002878-1-5)。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养及转染

前列腺癌细胞系LNCaP，C4-2，22Rv1，PC-3及Du145细胞均在10%胎牛血清的高糖RPMI-1640培养液中培养，细胞转染按照Lipofectamine 2000试剂说明书进行。……