王明喜,张丽霞,王长平
(安阳市中医院,河南 安阳 455000)
膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)是一种以膝关节软骨退变和损伤为主要病理特征的慢性退行性疾病,临床主要表现为膝关节疼痛、肿胀、功能障碍等[1-2]。该病好发于老年人,严重影响患者的生活质量[3]。修复受损的软骨是治疗KOA的主要方法[4],临床采用膝关节腔注射透明质酸等药物治疗KOA,在一定程度上能够缓解膝部疼痛、改善膝关节活动度,然而对于软骨损伤修复效果甚微[5-9]。中药在修复软骨损伤方面表现出一定的优势,马钱子常用于治疗骨关节炎,能够促进软骨损伤修复,临床疗效显著[10-12]。马钱子的主要有效成分是马钱子总生物碱,其修复软骨损伤的作用机制尚不明确。为了探讨马钱子总生物碱修复KOA软骨损伤的效果及作用机制,我们建立了大鼠KOA模型,并进行了相关实验研究,现总结报告如下。
1.1 实验动物12周龄SPF级雄性SD大鼠,体质量(220±10)g,购自广东省科学院健康医学研究所,实验动物许可证号:SYXK(粤)2018-0183。实验方案通过医学动物实验伦理委员会批准。
1.2 实验试剂木瓜蛋白酶(上海阿拉丁生化科技股份有限公司),苏木精伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色试剂盒、放射免疫沉淀法(radioimmunoprecipitation assay,RIPA)缓冲液、苯甲基磺酰氟(phenylmethylsulfonyl fluoride,PMSF)、牛血清蛋白(bovine serum albumin,BSA)和二喹啉甲酸(bicinchoninic acid,BCA)蛋白浓度测试试剂盒(上海碧云天生物技术有限公司),马钱子总生物碱(丽珠集团利民制药公司),塞来昔布胶囊(美国辉瑞公司),戊巴比妥钠(上海信裕生物科技有限公司),福尔马林(济南百博生物技术股份有限……