BMAL1对H2O2诱导的H9C2心肌细胞损伤的影响及机制探讨

易娜 ，袁李礼

随着经济发展、居民生活方式转变和人口老龄化加速，我国心血管疾病的患病率和死亡率呈逐年递增趋势［1］。研究显示，心血管疾病的急性发作发病时间和严重程度具有昼夜变化的特点，生物钟基因表达的改变参与心血管疾病的病理生理过程［2］。脑和肌肉组织芳香烃受体核转运蛋白的类似蛋白1（brain and muscle Ah receptor nuclear translocator protein-like-1，BMAL1）作为昼夜节律系统的核心基因之一，调控生物钟基因的转录［3］。因此，探讨BMAL1 对心血管疾病的调控机制有助于寻找新的心肌细胞保护策略和靶点。氧化应激是心血管疾病的发病机制之一，心血管疾病发作时机体会产生大量的氧自由基，导致氧化应激损伤，因此抑制氧化应激有助于改善心肌损伤［4］。核因子E2 相关因子2（nuclear factor E2-related factor 2，NRF2）/血红素加氧酶-1（heme oxygenase-1，HO-1）信号轴是调控氧化应激性疾病的重要靶点［5］。目前，BMAL1 是否通过调控NRF2/HO-1 信号轴而改善心血管疾病发作时的细胞损伤和氧化应激尚不清楚。本研究构建了过氧化氢（hydrogen peroxide，H2O2）诱导的H9C2 大鼠心肌细胞损伤模型，探讨节律基因BMAL1对心肌细胞损伤、氧化应激以及NRF2/HO-1 信号轴的影响，为揭示BMAL1在心血管疾病中的分子机制提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 主要材料和仪器 H9C2大鼠心肌细胞购自中国科学院上海细胞库，DMEM 培养基、胎牛血清、磷酸盐缓冲液（phosphate buffer saline，PBS）、胰酶和双抗购自Gibco 公司；CCK-8检测试剂盒购自上海东仁化学科技有限公司；超氧化物 歧 化 酶（superoxide dismutase，SOD）和 丙 二 醛（malondialdehyde，MDA）检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所；BMAL1过表达慢病毒购自上海吉凯基因化学技术有限公司；……