新生鼠缺氧缺血性脑损伤远期行为学研究

林爱金，王洁琼，敖丽娟，陈茉弦

昆明医科大学康复学院，云南昆明市 650500；

缺氧缺血性脑损伤(hypoxic ischemic brain damage,HIBD)由围产期缺血、缺氧引起，是导致新生儿脑损伤死亡或神经功能损害的最重要原因[1-2]，带来严重的神经系统后遗症，如脑瘫、癫痫、孤独症和智力障碍等[3]。动物行为学评价已作为较为可靠的手段应用于HIBD 模型，但主要集中于早期，且结论不一。本研究探讨脑损伤模型小鼠远期行为的变化，主要涉及运动、情绪和学习记忆。

1 材料与方法

1.1 试验动物

SPF 级C57BL/6 小鼠50 只，10 日龄，雌雄不限，体质量3.85～4.50 g，购自昆明医科大学实验动物中心，动物实验许可证号SCXK(滇)K2015-0002。室温(23±2)℃饲养，光照12 h(7:00 a.m.～7:00 p.m.)，自由饮食水。

1.2 试验器材

1.2.1 明暗穿梭箱

由塑料板围成40×40×35 cm 箱体，明箱底部和四壁均为白色，暗箱底部和四壁均为黑色，由一面40×35 cm的墙分隔，墙的底部中心有7×7 cm开口。

1.2.2 高架十字迷宫

由黑色木板围成两个开臂和两个闭臂，“十”字型摆放，臂底35×5 cm，闭臂墙高15 cm，开臂边缘由0.5×0.5 cm 的方块包围，距地面100 cm；中央平台为5×5cm正方形。

1.2.3 新事物试验箱

由透明塑料板围成50×50×50 cm 的正方形箱体，周围用黑布环绕。

1.2.4 Y迷宫实验

30×8×10 cm 迷宫臂3 个，相互间夹角120°。摄像机置于臂上方1.5 m，记录小鼠活动，Supermaze 分析软件(上海欣软信息科技有限公司)分析。

1.3 动物分组及造模

小鼠分为对照组(n=20)和HIBD 组(n=30)。HIBD 组异氟烷25 μl 吸入麻醉，固定于无菌动物手术台，颈部切口5～10 mm，分离左颈总动脉；5-0 丝线双重结扎左颈总动脉后离断，缝合伤口。手术操作控制在10 min内。

术后，小鼠置于带有母鼠气味的垫料上休息30 min，之后转移到母鼠旁休息1 h，再置于含8% O2和92%N2混合气体的34 ℃恒温缺氧箱中45 min。……