全反式视黄酸衍生物逆转高水平胰岛素对胃癌细胞BGC-823迁移的作用研究

王 陈，胡安拉，赵奇红，汪 渊，张素梅

随着卫生水平提高和预防措施的完善，中国胃癌的发病率和死亡率呈现下降趋势。但是，胃癌患者的代谢综合征或其相关疾病风险有所增高。代谢综合征相关疾病均由胰岛素抵抗导致，胰岛素抵抗会导致机体代偿性分泌更多的胰岛素。研究显示，高水平胰岛素人群胃癌的发生风险增加，高胰岛素相关饮食和生活方式与消化道肿瘤的风险也密切相关。胰岛素能促进一些肿瘤细胞迁移和侵袭。但胰岛素与胃癌迁移和侵袭之间的关系尚不清楚。

全反式视黄酸(all-trans retinoic acid,ATRA)能在胰岛素环境下抑制肿瘤的进展，但其副作用限制了它的临床应用。4-氨基-2-三氟甲基-苯基-维甲酸酯(4-amino-2-trifluoromethyl-phenyl retinate,ATPR)是安徽医科大学合成的一种ATRA衍生物，研究显示ATPR的抗肿瘤效果明显优于ATRA。该研究拟探讨在高水平胰岛素条件下，ATPR对胃癌细胞迁移能力的影响及其潜在的机制。

1 材料与方法

1.1 主要试剂与仪器

ATPR由安徽医科大学药学院合成，陈飞虎教授馈赠；ML-7[肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)抑制剂]购自美国Cayman公司；胰岛素和结晶紫购自碧云天公司；抗MLCK鼠一抗购自美国Santa公司；抗Claudin 18兔一抗购自英国Abcam公司；抗GAPDH兔一抗、山羊抗兔IgG和山羊抗鼠IgG二抗购自美国CST公司；RPMI-1640培养基、胎牛血清、100×anti-anti和Trypsin-EDTA购自美国Gibco公司；CCK-8试剂购自Biomiky公司；4%多聚甲醛购自武汉塞维尔公司；RIPA裂解液和BCA蛋白定量试剂盒购自美国Thermo Scientific公司；PVDF膜购自美国Millipore公司；ECL化学发光显影液购自天能公司；Transwell小室购自美国Corning公司。

1.2 细胞培养

人低分化胃癌细胞株BGC-823购自上海中科院细胞库；……