新生期小鼠七氟醚暴露对其青春期学习记忆及海马组织髓鞘损伤的影响

张 意，杨志来，张继千，刘学胜

全球每年有数百万儿童在全麻下接受手术治疗，但全麻药物对儿童中枢神经系统的影响尚不明确。2016年FDA提出，3岁以下儿童和孕晚期孕妇，长时间或多次全麻药物和镇静剂暴露可能会影响儿童的大脑发育，中枢神经系统髓鞘在学习及记忆中扮演重要角色，可能参与该过程。挥发性全麻药物七氟醚可通过抑制海马GSK3β/β-catenin信号通路中GSK3β的Ser9位点磷酸化进而损害成年大鼠记忆巩固，该信号通路在髓鞘基因表达过程中发挥关键作用。该研究拟建立新生期小鼠多次七氟醚暴露模型，探究七氟醚暴露对小鼠海马组织髓鞘损伤及青春期学习记忆功能的影响，并初步揭示GSK3β/β-catenin信号通路在其中的作用，为临床儿童麻醉管理提供指导，降低七氟醚对儿童中枢神经系统的不良影响。

1 材料与方法

1.1 实验动物

健康SPF级8～10周C57BL/6小鼠，购自上海斯莱克生物有限公司，6日龄小鼠由繁殖获得。动物生产许可证号：SCXK(沪)2017 - 0005。饲养条件为SPF级环境，温度为(23±3) ℃，湿度为40%～70%，12 h/12 h明暗交替，自由饮水、摄食。

1.2 主要试剂与仪器

七氟醚(批号：20120931)购自上海恒瑞医药有限公司；氯化锂(批号：310468)购自美国Sigma公司；MBP抗体(批号：10458-1-AP)购自Proteintech公司；pGSK3β抗体(批号：5558)、GSK3β抗体(批号：9327)、β-catenin抗体(批号：8480)购自美国Cell Signaling Technology公司；β-actin抗体(批号：8226)购自英国Abcam公司。七氟醚挥发罐购自德国Drager公司。

1.3 分组与处理方法

6日龄C57BL/6小鼠随机分成4组，即对照组(CON组)、七氟醚组(SEVO组)、对照+氯化锂组(LiCl组)、七氟醚+氯化锂组(SEVO+LiCl组)。分子生物学实验，每组小鼠5只，新物体识别实验，每组小鼠15只，Y迷宫实验，每组小鼠15只。……