猪烧伤创面渗出液蛋白质组学及创面修复过程中蛋白水解动态变化研究

高 兵，韩志芬，曲 滨，李 巍，杜广刚

烧伤创面愈合是一个动态和复杂的过程，涉及损伤区周围的各种介质和多种细胞类型。关于烧伤创面愈合、瘢痕形成细胞和分子机制仍然知之甚少，因此，寻找可能改善身体的自然修复机制的临床策略将需要基于对修复和再生的基本生物学的透彻理解。烧伤创面渗出液代表着烧伤创面的微环境，从中提取与细胞组分、信号传导和蛋白质等相关信息有助于判断烧伤损害程度、创面深度和可能的全身并发症。由于创面渗出液影响创面愈合及创基生理，现在新的治疗方法正在向改善创面渗出液转变。此外，研究证实烧伤创面渗出液与瘢痕形成有关。目前已知的烧伤创面渗出液分子生物学相关知识还知之甚少，我们推测对烧伤渗出液的研究可能与烧伤创面愈合、瘢痕形成、烧伤创面转变和烧伤创面深度判断的机制关联密切。近年来，蛋白质组学的应用改变了探寻指示创面愈合以及对治疗的反应标志物。基于此，该研究利用末端胺底物同位素标记技术(terminal amine isotopic labeling of substrates，TAILS)评估创面愈合渗出液蛋白水解事件，通过同位素标记相对或绝对定量技术(isobarictag for relative and absolute quantitation，iTRAQ)定量分析烧伤创面愈合不同时期创面渗出液蛋白质和蛋白N端动态变化，旨在为判断烧伤患者创面愈合情况提供新的临床检验方法。

1 材料与方法

1.1 体猪创面模型制备及渗出液提取