MALDI-TOF MS对临床侵袭性丝状真菌的快速鉴定技术的研究

张景 姜斌 彭娜 欧阳鹏文 徐文 宁兴旺 刘琼 谢良伊

[1.湖南省人民医院(湖南师范大学附属第一医院)检验科，长沙 410005；2.湖南省中医药大学第一附属医院医学检验中心，长沙 410007]

侵袭性丝状真菌是引起免疫功能不全或有基础疾病的患者呼吸道感染和死亡的重要原因，且具有病情危重、发展迅速、临床预后差以及病死率高等特点，应引起高度重视[1]。传统丝状真菌鉴定方法主要依靠形态学的观察，有时难以得到准确的鉴定结果。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)是近年来发展起来的一种非常重要的病原微生物鉴定的新方法[2]，除了有较高的准确性外，其最大优点是能在很短时间内完成病原微生物的鉴定，具有操作简便、鉴定迅速、准确率高和成本低的特点，近年来开始用于细菌、酵母菌及丝状真菌的鉴定，可替代常规鉴定方法，降低周转时间[3-4]。

本文对从临床患者分离了91株常见丝状真菌，用MALDI-TOF MS和传统形态学方法同时进行鉴定，采用分子测序方法作为“金标准”，验证质谱技术的鉴定结果，探讨质谱技术在丝状真菌鉴定中的应用价值。

1 材料与方法

1.1 菌株来源

收集2017年4月—2019年7月本院各种类型临床标本中分离培养的65株丝状真菌(已剔除同一患者多次送检培养后所得同一种菌)，以及某三甲医院惠赠的26株丝状真菌，总共91株临床常见的丝状真菌。初步鉴定为丝状真菌的菌株保存在菌种保存管里，将其置于-80℃冰箱冷冻保存。大肠埃希菌ATCC8739作为校准和内质控菌株，ATCC16888黑曲霉及ATCC10106产黄青霉作为研究质控菌株。……