CRISPR-Cas9基因编辑技术在念珠菌中的应用研究进展

于淑颖 周梦兰 孙天舒 张丽 徐英春

(1.中国医学科学院北京协和医院检验科，北京 100730；2.中国医学科学院北京协和医学院研究生院，北京 100730；3.中国医学科学院北京协和医院医学科学研究中心，北京 100730；4.侵袭性真菌病机制研究与精准诊断北京市重点实验室，北京 100730)

近年来，真菌感染已经成为严重威胁全球健康的疾病，全球约有3亿人遭受了侵袭性真菌感染，造成每年约有160万人死亡，接近结核病的死亡人数[1]。尤其随着免疫功能低下人群的不断增加，侵袭性真菌感染导致的死亡率高达30%～90%[2]。念珠菌属是真菌感染的主要致病菌，白念珠菌仍然是最常见的菌种，而非白念珠菌侵袭性感染所占的比例明显升高[3-4]。目前，念珠菌对抗真菌药物的耐药问题面临严峻的挑战，光滑念珠菌对棘白菌素类药物的高度耐药性在美国和欧洲地区引起了广泛关注[5]。近年来，我国热带念珠菌和光滑念珠菌对唑类药物的耐药率显著升高，角膜念珠菌和解脂念珠菌等少见菌种也呈现出极高的氟康唑和伏立康唑耐药率[3]。此外，新兴的多重耐药病原体—耳念珠菌对全球的公共卫生构成了威胁[6]。

在这种情况下，亟需深入理解真菌病原体的生物学和病理生理学，并阐明耐药机制。因此，对于高效基因操作工具的需求十分迫切，然而，对真菌的基因操作通常费时且麻烦，特别是在缺乏性周期的二倍体菌种中。此外，转化和/或同源重组效率低，缺乏天然质粒、克隆载体，或者有限的筛选标记等也是阻碍该过程的重要原因[7]。……